目的 分析胶质2母细胞瘤(GBM)中相关调控基因，为其临床治疗提供一定的理论依据。方法 收集了86例GBM患者为研究对象，取全部患者的肿瘤组织及癌旁组织；并将A172细胞进行培养和转染，48 h后利用荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测基因表达情况，通过CCK8实验检测细胞增殖情况。结果 GBM肿瘤组织中的ICP22BP mRNA及蛋白2表达水平要显著高2于癌旁组织，差异具有统计学意义(P<0.05)。ICP22BP表达减少会显著抑制A172细胞的增殖；A172细胞中敲低ICP22BP的表达可以显著抑制wnt信号通路下游相关基因(cMYC,c-JUN,WISP1和PPARD)表达。结论 胶质母细胞瘤癌组织的ICP22BP表达量要显著高于癌旁组织中的表达量。且ICP22BP下调后可以抑制Wnt相关信号通路下游基因的表达并抑制A172的细胞增殖。

外泌体和EMT在宫颈癌发生发展中均发挥了重要作用。外泌体可通过改变肿瘤微环境、促进肿瘤血管生成而影响宫颈癌疾病进展。EMT可影响肿瘤侵袭迁移能力，宫颈癌细胞的EMT可被miRNA、lncRNA、蛋白质等活性物质调控。而各种细胞、组织来源的外泌体包含丰富的蛋白质、脂质、核酸等多种活性物质，可直接或通过Wnt/β-catenin、PTEN/PI3K/Akt等信号#keep##links#通路调控肿瘤EMT，然而对外泌体在宫颈癌EMT中作用的了解仍有限，还需要大量研究数据支持。对宫颈癌EMT及外泌体对其的作用展开讨论，拟为研究外泌体在宫颈癌EMT中的作用提供方向，为宫颈癌诊断、治疗等研究提供新的思路。
目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)分型检测联合液基薄层细胞检测(TCT)检查在早期宫颈癌筛查中的应用价值。方法选取2016#keep##links#年4月至2019年10月于本院确诊的168例宫颈癌患者作为研究对象,所有患者入院后均于治疗前接受HPV分型检测、TCT检查及病理学检查。检查结束后统计84例患者HPV分型检测、TCT检查结果,比较HPV分型检测、TCT检查结果,以病理学检查结果为金标准,一致性分析HPV分型检测、TCT检查及HPV分型检测、TCT检查联合诊断宫颈癌的准确性。#keep##links#结果 168例宫颈癌患者HPV分型检测阳性检出率为47.62%(80/168),HPV高危型检出率为67.50%(54/80),HPV低危型检出率为32.50%(26/80)。168例宫颈癌患者TCT检查阳性率为51.19%(86/168),低度鳞状上皮病变(LSIL)检出率为16.28%(14/86),高度鳞状上皮病变(HSIL)检出率为37.21%(32/86),鳞状细胞癌(SCC)检出率为46.51%(40/86)。

结果显示，相比对照组，HLAP模型大鼠胰腺组织细胞自噬水平明显增加，炎症损伤程度更重；给予雷帕霉素后，HLAP模型大鼠胰腺组织细胞炎症损伤程度进一步加重，并出现大量细胞凋亡；而给予3-甲基腺嘌呤后，HLAP模型大鼠胰腺组织细胞自噬水平及炎症损伤程度明显减轻。雷帕霉素可加重HLAP模型细胞自噬及炎症损伤程度，siV EGF转染通过上调mT ORC1蛋白表达水平，selleck合成减轻HLAP模型细胞自噬及炎症损伤。上述结果提示，VEGF诱导自噬在HLAP胰腺组织细胞损伤中发挥关键作用，干扰VEGF-mTORC1通路可减轻自噬水平，缓解HLAP胰腺组织细胞炎症损伤。本研究为靶向干预和防治HLAP提供了新的靶点。
缺血性脑卒中是一种严重的脑血管疾病,具有高发病率、高致残率和高死亡率的特点.自噬是指细胞利用溶PRIMA-1MET酶体降解受损细胞器和大分子物质的过程.缺血后脑内自噬被激活,然而自噬在缺血性脑卒中过程中的作用尚存争议.近年来,越来越多的证据提示自噬通过多种机制减缓了缺血性脑卒中损伤.本文回顾了缺血性脑卒中诱导自噬的主要病理因素,探讨了自噬在缺血脑内的作用及其机制,总结了缺血性脑卒中过程中自噬的调节剂,以期更新对缺血性脑损伤过程中自噬作用及其机制的LDK378花费认识,为相关抗缺血性脑卒中药物的研究提供新的思路.
背景作者团队前期证实糖尿病促进牙周炎的发生发展,而牙周炎是否促进糖尿病发展?目的探索牙周炎促进糖尿病发展的分子机制。方法体外培养小鼠胰岛素瘤βtc6细胞,分为对照组、葡萄糖组、脂多糖组、葡萄糖+脂多糖组,采用不同浓度葡萄糖(0,25,50,100 mmol/L)和脂多糖(0,10,20,40 mg/L)单独或联合刺激βtc6细胞12 h,检查每组胰岛素分泌量。

晚期宫颈癌组PAK6、GOLPH3、EZH2 mRNA表达量显著高于早期宫颈癌组,差异具有统计学意义(P<0.05);晚期宫颈癌组Bin1 mRNA表达量显著低于早期宫颈癌组,差异具有统计学意义(P<0.05);早期宫颈癌组及晚期宫颈癌组肿瘤组织增殖基因叉状头/翅膀状螺旋转录因子(FOXP3)、INK4、血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)、同源盒基因以及B7(HOXB7) mRNA表达量显著高于癌旁正常组织,LRRC3B mRNA表达量显著低于癌旁正常组织(P<0.05)。晚期宫颈癌组FOXP3、INK4、PAX6、HOXB7 mRNA表达量显著高于早期宫颈癌组,差异具有统计学意义(P<0.05);经Spearman相关性分析发现外周血单核细胞NF-κB、TLR4 mRNA表GSK 3 抑制剂达与宫颈癌患者肿瘤组织增殖基因FOXP3、INK4、ANGPTL4、HOXB7 mRNA水平呈正相关(P<0.05);与肿瘤组织侵袭基因PAK6、GOLPH3、EZH2 mRNA表达量呈正相关,与Bin1 mRNA表达量呈负相关(P<0.05)。结论外周血单核细胞中TLR4、NF-κB表达越高,宫颈癌分期及肿瘤恶性程度越高,可Rapamycin价格能作为肿瘤病情判断的简便手段,值得深入研究。
目的分析宫颈癌组织Runx2和Runx3基因的表达及其在临床中的应用价值。方法选取2014年1月至12月石家庄市第四医院手术或活检获取的宫颈组织标本65例作为研究对象,其中宫颈癌组织30例,宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ组织10例,CINⅡ组织15例,正常宫颈组织10例。采用实时荧光定量PCR检测以上组织中Runx2 mRNA和Runx3 mRNA表达情况。

目前观点认为,miRNA通常通过与靶基因mRNA的3’UTR结合,抑制靶基因的翻译。本研究筛选miR-1296-5p靶基因并进行验证,阐明其作用机制。方法在胃癌细胞系SGC-7901和MGC-803中转染miR-1296-5p-mimics或miR-1296-5p-iFlavopiridol价格nhibitors过表达及敲低miR-1296-5p。用Targetscan软件(targetscan.test/ucsc.html)、miRBase软件(http//www.mirbase.org)和PicTar软件(http//pictaTPX 0005r.mdc-berlin.de)预测miR-1296-5p靶基因,从中筛选出表达受到miR-1296-5p负性调控的蛋白,并用Real-time PCR及Western blot方法进行验证。在40对胃癌患者的肿瘤及癌旁标本中验证miR-12并且96-5p和靶基因表达的相关性。构建含有靶基因mRNA的3’UTR区荧光报告质粒,用荧光素酶活性分析,证实miR-1296-5p与靶基因mRNA的3’UTR区的结合。用补救实验,在过表达miR-1296-5p的胃癌细胞中,转染靶基因过表达质粒,检测胃癌细胞的增殖和侵袭能力,明确miR-1296-5p通过靶基因发挥的抑癌作用。

结论下调TINCR可以通过靶向促进miR-7表达抑制肝癌细胞Huh7侵袭和迁移。
目的以细胞受体、关键基因和调控分子为靶点的靶向药物的出现为肝癌治疗提供新思路,但化疗及靶向药物耐药也成为了待解决的关键问题。本研究通过对肝癌耐药与10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物基因(gene of phosphate and tension homology deTideglusib IC50leted on chromsome ten,PTEN)、蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)和核因子κB(nuclear factor kappa beta,NF-κB)分子机制的探讨,以期为解决肝癌耐药提供新思路和方向。方法应用PubMed、Web of Science和CNKI期刊全文数据库检索系统,以”肝癌、通常耐药、PTEN、Akt和NF-κB”为关键词,检索自建库至2019-04的相关文献。共检索到中文文献47篇,英文文献593篇。纳入标准(1)肝癌的流行病学及治疗现状;(2)PTEN、Akt、NF-κB与肝癌耐药的相关机制研究。排除标准(1)肝癌诊断和预防;(2)研究资料不完善;(3)低质量文献。根据纳入和排除标准,符合分析的文献共52ICG-001化学结构篇。结果以PTEN、Akt和NF-κB为关键点,分别探索其上游通路和下游通路对肝癌耐药的影响。肝癌耐药与PTEN、Akt和NF-κB呈现明显的相关性,这是导致其复发及预后不良的主要原因之一。虽然现有肝癌耐药与PTEN,Akt和NF-κB分子机制的研究相对较少,但研究质量较高且有一定参考价值。结论探讨肝癌耐药与PTEN、Akt和NF-κB分子机制的同时,寻找更多肝癌耐药相关靶点,为临床上解决肝癌耐药提供思路和方向。

最后,基于上述膜定位序列的分析结果,设计了一个能使细胞内源RNA富集到外泌体中的光调控系统。通过体外实验,进一步对外泌体作为RNA药物递送系统的可行性进行了验证。具体的实验内容和结果包括(1)采用密度梯度离心收集了几种不同白血病细胞系分泌的外泌体,并通过质谱组学对其蛋白表达谱进行了鉴定。结果表明,不同细胞系衍生的外泌体具有不同的蛋白表达谱,但都有核仁素蛋白的表达。结合流式细胞分析技Erastin花费术,进一步证明了核仁素存在于白血病相关外泌体膜的表面,而不存在于正常细胞所衍生外泌体膜的表面。因此,核仁素蛋白可能是白血病相关外泌体的标志蛋白之一。(2)结合适配体识别、磁性富集和滚环扩增(Rolling circle amplification,RCA)基于的双信号放大技术,建立了一个检测白血病细胞来源外泌体的超灵敏荧光生物传感器。首先,通过琼脂糖凝胶电ABT-263半抑制浓度泳对实验过程中核酸产物的分析,证明了该方法的可行性。然后,通过比较检测体系中信号放大前后的荧光强度,表明该系统可以实现外泌体检测信号的增强。最后,在优化的最佳传感参数下,分析了该传感器对外泌体检测的特异性和灵敏度。结果表明,其可以使得低至1×10~2/μL的外泌体被检测到,且具有很好的特异性。此外,将该方法还成功分析了血清样品中的外泌体。(3)分析了四种不时间同膜定位序列(Palm、PB、CAAX、CD63)与靶蛋白mCherry进行融合表达后,mCherry被分选入外泌体中量的差异。首先,构建了靶蛋白mCherry分别与三种不同膜定位肽和一种跨膜蛋白融合表达的质粒,以及分别表达相应蛋白的稳转细胞系。通过对mCherry在细胞中的荧光成像分析,证明了不同的膜定位序列使其分布在了细胞的不同位置上。收集相应细胞分泌的外泌体后,采用蛋白免疫印迹和流式细胞技术对其中mCherry的表达量进行分析。

以上结果表明,肝癌细胞存在CAMSAP2依赖性非中心体微管;干扰CAMSAP2表达,能够改变微管组装模式,抑制肝癌细胞微管骨架重排及迁移极性的获取。第四部分(1)Western blot结果表明,干扰CAMSAP2表达后,乙酰化微管表达显著降低。反之,过表达CA此网站MSAP2则上调肝癌细胞乙酰化微管修饰水平。(2)免疫荧光结合划痕愈合实验结果显示,干扰CAMSAP2表达后,原本朝向细胞运动方向的乙酰化微管网络极性消失。(3)Western blot结果表明下调CAMSAP2表达后,HDAC6及SIGSK1210151A购买RT2表达增加,而α-TAT1表达未见明显变化。反之,过表达CAMSAP2后,HDAC6及SIRT2表达显著降低。(4)使用HDAC6及SIRT2特异性抑制剂处理肝癌细胞,Western blot及免疫荧光结果表明HDAC6失活能够促进BTSA1花费肝癌细胞乙酰化微管表达及正确极化。(5)Transwell迁移侵袭实验进一步表明抑制HDAC6表达或活性后肝癌细胞迁移侵袭能力显著增加。以上结果表明,CAMSAP2能够通过促进微管乙酰化修饰进而调控肝癌细胞骨架重排及迁移极性获取。而HDAC6下调可能在CAMSAP2介导的微管乙酰修饰促进肝癌侵袭转移中发挥重要作用。

观察组中MMP-7阳性表达率明显高于对照组,P <0. 05。50例高-中分化结肠癌患者中,MMP-7阳性表达率明显低于低分化结肠癌中; 40例无淋巴结转移结肠癌组织中MMP-7阳性表达率明显低于伴淋巴结转移结肠癌组织,P <0. 005; 90例未伴远处selleck kinase 抑制剂转移结肠癌组织中MMP-7阳性表达率为54. 4%,与伴远处转移结肠癌组织(50. 0%)比较,P=0. 789; TNM分期Ⅰ～Ⅱ期结肠癌组织中MMP-7阳性表达率(19. 0%),明显低于TNM分期Ⅲ～Ⅳ期(77. 6%),PNVP-AUY922临床试验=0. 000。结论结肠癌组织中MMP-7、MTA2表达水平较高,且与患者肿瘤临床分期和分化程度及淋巴结转移有关,因此临床可通过检测MMP-7、MTA2表达水平来判断患者病情程度,有效评估患者预后。
研究目的肝转移是结肠癌患www.selleck.cn/products/gdc-0032.html者最主要的死亡原因,也是临床治疗的重点及难点,肿瘤的转移与机体免疫力密切相关。本实验通过经脾注射法建立结肠癌肝转移裸鼠模型,研究艾灸干预对造模裸鼠结肠癌脾脏移植瘤及肝转移的影响,以明确艾灸效应,为临床结肠癌肝转移的治疗丰富艾灸干预策略;并进一步检测艾灸干预对裸鼠固有免疫细胞的影响,为阐明其潜在作用机制做前期探索。

2.通过q RT-PCR技术分析MYLK-AS1与miR-141-3p在肝癌细胞中的相互调控作用,采用双荧光素酶报告实验检测MYLK-AS1与miR-141-3p的结合情况。3.在肝癌细胞中分别或共同转染MYLK-AS1与miR-141-3p,通过流式分析技术明确二者共表达和肝癌细胞周期及凋亡之间的关系,利用Western blot检测靶基因CDC25Awww.selleck.cn/products/crenolanib-cp-868596.html及细胞周期Rb/E2F通路中关键蛋白分子的表达情况。研究结果1.通过TCGA数据库肝癌与正常肝组织RNA数据的下载及分析,筛选出肝癌中差异表达的基因,1992个mRNA,1082个lncRNA和126个miRNA;利用miRcode、star Base和miRTar Base预测lncRNA-miRNA和miRNA-mRNA的关Elafibranor细胞系系对,建立相互调控的ceRNA网络;Kaplan-Meier生存分析筛选出与预后相关的lncRNA13个,mRNA20个。选出4个高表达且与预后负相关的lncRNA,利用q RT-PCR在肝癌细胞系中进行验证,发现MYLK-AS1在肝癌细胞系中表达高于正常肝细胞,因此将MYLK-AS1作为目标研究基因进行进一步的功能研究。2.q不 RT-PCR检测表明44例HCC组织中MYLK-AS1的表达明显高于癌旁组织(p=0.0268),具体的表达水平和病理TNM分期(p=0.022)、肿瘤分化程度(p=0.049)正相关;72例肝癌组织原位杂交结果表明,HCC组织和非癌组织中MYLK-AS1均有表达,但肝癌组织中MYLK-AS1染色评分更高,且MYLK-AS1表达高低除了与TNM分期及肿瘤分化程度相关,还受到血管浸润及患者生存时间的影响。