5uM/L的抑制剂S1021(Dasatinib)、S1111(XL880)分别作用于小鼠MC3T3-E1细胞。与对照组比较,S1021组Sub-G1细胞比例显著增高(P=0.00)；S1111组Sub-G1期细胞比例显著升高(P=0.01),且两组药物间无显著差异(P=0.26)。 3、与对照组比较,S1021可以抑制CCND1的表达,且可降低P-AKT的水平,对于P53及BAX的表达无明显影响。S1111可以抑制CCND1的表达,而对P-AKT、P53及BAX表达无明显影响。 结论：抑制SRC/ABL可以通过抑制AKT的磷酸化并下调CCND1抑制成骨细胞MC3T3-E1的增殖,抑制VEGFR/MET可以通过下调CCND1抑制成骨细胞增殖,说明SRC/ABL通过依赖AKT磷酸化的信号通路在成骨细胞增殖过程中起到关键作用。VEGFR/MET受体介导的信号通路在成骨细胞增殖中同样发挥重要作用,且其介导成骨细胞增殖过程不依赖于AKT的磷酸化。
背景 PRT062607 价格 胃肠道间质瘤是最常见的间质源性的消化道肿瘤,该肿瘤主要分子特点是存在能够异常激活KIT与PDGFRA的基因突变。虽然病例的总体生存率随着酪氨酸激酶抑制剂的问世得到了很大的改善,但由于治疗过程中会产生KIT或PDGFRA的继发性突变,大多数病例最终仍然会发展到耐药阶段,造成病情的恶化。近来的研究表明,组蛋白乙酰基转移酶(histone

acetyltransferase, HAT) CBP及p300的功能与多种肿瘤的发生发展密切相关,而应用针对CBP和p3DD的靶向小分子抑制剂则可以抑制某些实体瘤细胞的增殖并且诱导肿瘤细胞发生凋亡。此外,另有报道显示,CBP/p300可以在体外细胞模型中直接作用于一种转录因子ETV1,通过催化ETV1的乙酰化从而促进其的转录活性；而在GIST组织中,ETV1则有着特异性的表达,并且被认为是一种与GIST生存相关的特殊因子。因此,转录后乙酰化修饰在GIST起源与成瘤过程中的潜在作用已逐渐受到重视。

目的 明确ETV1在GIST组织与细胞中的表达特征及潜在生物学作用,进而探究其调控因子CBP/p300在GISTs成瘤和肿瘤细胞增殖过程中的作用,并评估它们在GIST靶向治疗中的应用前景。对选择性CBP/p300抑制剂C646的潜在治疗作用进了探索,并对具体的分子机制进行了深入的研究。 方法 通过向GIST细胞转染特异的小干扰RNA序列从而下调细胞中的ETV1.CBP以及p300的表达。GIST肿瘤以及瘤旁组织中的c-Kit与ETV1的表达由免疫组织化学染色法检测。用浓度递增的C646对肿瘤细胞GIST882进行培养,同时设置了与低浓度的伊马替尼联合用药组。运用实时荧光定量PCR以及Western blot分析技术检测转染小干扰RNA后ETV1、CBP和p300分别在mRNA水平及蛋白水平的表达情况。 GIST细胞的细胞活力由CCK-8分析法来测定。细胞凋亡的检测则由caspase活性分析以及Annexin V/PI染色后的流式细胞仪分析完成。肿瘤细胞经PI单染后由流式细胞仪分析以检测细胞周期改变。与这些细胞生物学活性及功能变化相关的信号通路的分子改变是由Western 没有 blot技术检测分析的。 结果 GIST组织和细胞(GIST882)中均有ETV1的特征性表达,而下调GIST细胞的ETVl表达则将抑制肿瘤细胞的增殖并且诱发细胞凋亡。在转录水平上抑制CBP的表达可以阻止GIST882的细胞增殖,而p300的表达下调对肿瘤细胞增殖无明显抑制作用。干扰CBP与p300的表达均能激活肿瘤细胞的caspase活性,进而诱导细胞凋亡。GIST细胞的CBP以及p300的表达下调后,ETV1的表达下降,KIT的磷酸化受到抑制,并且均能通过激活线粒体凋亡途径诱导细胞凋亡。CBP表达下调会导致增殖相关的ERK1/2失活并伴随JNK的磷酸化水平上调,而在p300干扰组中并未观察到上述信号通路的功能改变,因此与p300相比,CBP在肿瘤细胞的增殖和生存过程中起到了更为重要的作用。应用CBP/p300的选择性抑制剂C646可以有效抑制GIST细胞的增殖。经过C646的处理后,肿瘤细胞出现细胞凋亡以及细胞周期阻滞,表明细胞凋亡的诱导以及细胞周期的阻滞能够促进增殖抑制作用。此外,与CBP干扰组的结果类似,C646可以通过抑制KIT的激活进而阻断下游信号通路激活与转导。

TG101209数据表 结论 下调GIST细胞中的CBP可以诱导细胞凋亡进而抑制肿瘤细胞活力,而干扰p300表达并不能有效抑制肿瘤细胞的增殖。因此,与p300相比,CBP是更具靶向优势的治疗靶点。引起上述的GIST肿瘤抑制作用的分子机制涉及ETVl表达的下调、肿瘤细胞增殖相关的KIT及其下游效应因子ERK1/2和Akt的功能失活、JNK以及线粒体凋亡途径的参与等。选择性乙酰基转移酶抑制剂C646可以抑制GIST细胞的增殖并诱导细胞凋亡,这种作用主要是通过抑制CBP的功能而实现的。综上所述,对于GIST分子治疗而言,CBP是更具靶向优势的潜在治疗靶点,而应用选择性组蛋白乙酰基转移酶抑制剂则有望成为今后靶向治疗GIST的抗肿瘤治疗策略。
全球范围内,肺癌都是发生率和死亡率都是居高不下；尤其在中国,肺癌的发生率和死亡率都高居癌症类榜首；因此急需探索肺癌的治疗方法。肺癌是肺部癌症的统称,然而肺部癌症可以具体可分为非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)和小细胞肺癌(small cell lung cancer, SCLC),而非小细胞肺癌又可进一步分为腺癌、鳞癌和大细胞癌,此外临床上又将其分为0、Ⅰ,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期。肺癌是一个系统病,有着复杂的发生原因和临床特征,因此针对不同类型的肺癌就需要个性化治疗,主要的治疗方法有放化疗、手术治疗以及近年来高速发展的小分子抑制剂,然而这些治疗方法都有一定局限性,因此科学家们将目光转向中医的瑰丽宝库,希望能从中草药中提取出能治疗肺癌的天然化合物。本篇论文主要研究了：1.