结果：44种抑制剂处理MC3T3-E1细胞后,通过MTS法检测发现7种抑制剂能明显抑制MC3T3-E1细胞的增殖活性,分别抑制ⅠGF-1R/INSR/ALK、AKT、 SRC/ABL、KIT、PI3K、MET/VEGFR、mTOR等信号分子。选取AKT信号分子进一步研究,向MC3T3-E1细胞中加入AKT抑制剂PF-04691Talazoparib研究购买502,通过FACS法检测MC3T3-E1细胞的周期,与对照组相比,处于G1期的细胞比例明显增加,S期和G2/M期的细胞比例降低,说明细胞发生了周期阻滞,细胞增殖活性降低。接着,通过Western blot检测,我们发现抑制剂处理后的MC3T3-E1细胞内磷酸化的Akt、CCND1表达降低,进一步说明EPZ-6438分子量细胞周期受到抑制,并且这种抑制作用与Akt磷酸化水平降低有关。 结论：可能有多条信号通路影响成骨细胞的增殖,PI3K/Akt信号通路能促进成骨细胞增殖。
目的1、通过44种细胞常见信号通路蛋白靶向抑制剂作用小鼠MC3T3-E1细胞,从中筛选出对细胞的增值有明显抑制作用的抑制剂。 2、选取有效抑制剂作一般用于小鼠MC3T3-E1细胞,观察抑制剂对细胞周期的影响以及对细胞周期与细胞凋亡相关蛋白表达的影响。探讨影响成骨细胞增殖的相关信号通路。 方法1、应用44种细胞信号蛋白抑制剂,分别以4种不同浓度(0.01uM/L、0.1uM/L、1uM/L、10uM/L)作用于小鼠MC3T3-E1细胞,应用MTS法检测各组细胞存活率,筛选出对小鼠MC3T3-E1细胞有明显抑制且呈剂量依赖性的抑制剂。

结果表明,被15nnm与50nm二氧化硅纳米粒子处理的幼鱼的神经行为毒性,死亡率和畸形率有着明显的浓度依赖效应。通过K聚类分析发现15nm的二氧化硅的神经毒性大于50nm的二氧化硅；而50nmm的二氧化硅的发育毒性大于15nm的二氧化硅。在本论文的第三部分我们以斑马鱼的成年鱼为研究对象,模拟了自然条件下水体中的不同粒径(15nm和50nm)与不同浓度(低浓度300μg/ml与高浓度selleck化学1000μg/mL的)二氧化硅纳米粒子对成年斑马鱼的高级认知行为(颜色偏好)的影响,以及探究了二氧化硅纳米粒子潜在的致阿兹海默症的行为的潜在效应。伴随着各个学科的快速发展,生物行为背后的机制的解析亟需借助多学科联合研究的方式。在这里,我们展现了借助多学科技术的方式来研究二氧化硅纳米粒子干扰了斑马鱼的神经行为并且解析了影响此神经行为的可能的生理机制。我们应用GSK2118436分子量斑马鱼作为动物模型借助行为学以及生理学的分析来评价不同粒径(15nm与50nm)以及不同浓度的(低浓度300μg/mL与高浓度1000μg/mL)的二氧化硅纳米粒子的神经毒性。借助视频跟踪与数据挖掘技术,我们检测到了行为表型的改变。我们发现,较之50nm的二氧化硅纳米粒子,15nm的二氧化硅粒子能够对斑马鱼的认知的神经行为模式造成显著的改变,并且能够导致潜点击此处在的类帕金森氏病样的行为。在组织,细胞以及分子水平的的分析与行为学分析的结果一致,显示出纳米粒子通过作用于视网膜以及脑中的多巴胺神经元来改变颜色的偏好以及潜在地引起类派金森样的行为。
目的:用SHG-44胶质瘤在裸鼠皮下做胶质瘤模型,观察Aurora B抑制剂AZD1152-HQPA、替莫唑胺和联合处理对肿瘤生长的影响,测定实验结束时肿瘤细胞Bax的表达,探索其与用药相关性,为Aurora B抑制剂联合化疗治疗胶质瘤提供实验依据。

目的：晚期非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）的三线化疗作用仍然不明确。我们回顾性分析既往一二线化疗失败后NSCLC患者再次给予三线化疗，分析其近期疗效、不良反应及生存状况，并探讨影响三线化疗疗效和生存的相关因素。 方法：52例晚期NSCLC患者一二线化疗失败后给予三线化疗，主要药物包括培美曲塞、紫杉醇selleck类和伊立替康。与三线化疗近期疗效相关的多因素回归分析采用二分类Logistic回归，生存分析采用Kaplan-Meier法，组间差异采用Log-rank检验。与患者三线化疗OS相关的临床因素采用Cox回归法。 结果：52例晚期NSCLC患者三线化疗的ORR是5.7%（95%CI为1.2%-15.9%），DCR为34.6%（9还有5%CI为21.7%-47.5%），PFS是2.3个月，OS是4.51个月。Logistic回归分析显示PS评分和三线化疗方案（两药）是影响三线NSCLC化疗近期疗效的相关因素。Cox比例风险模型显示三线化疗疗效是影响三线化疗NSCLC患者OS的独立预后因素。伴有肿瘤相关症状45例三线化疗后有22例（48.8%）症状缓解。治Ruxolitinib订单疗相关死亡2例患者PS评分差，死于粒细胞缺少性发热，30例（57.7%）患者出现III-IV度不良反应，最主要为IV度骨髓抑制（50%）。两药化疗较单药化疗的不良反应发生率高。年龄大于65岁、PS评分差、一二线化疗出现过III-IV度骨髓抑制的患者三线化疗更容易发生III-IV度骨髓抑制。 结论：晚期NSCLC患者三线化疗疗效适中，但相当一部分患者可有效缓解肿瘤相关症状，控制疾病进展，毒性反应可耐受。

选用人卵巢癌细胞株OVCAR-8、A2780、SKOV3,骨肉瘤细胞株KHOS、U2OS,非小细胞肺癌细胞株H460.NCI-H1299,前列腺癌细胞株PC3,膀胱癌细胞株5637,乳腺癌细胞株MDA-MB-468为研究对象,考察原癌基因c-Myc在AZD1152与顺铂序贯合用中所发挥的作用。采用SRB法检测AZD1152与顺铂在不同细胞株中的序贯合用效果,并计算合用指数(CI)；采用哪里SiRNA技术沉默OVCAR-8细胞c-Myc的表达；采用慢病毒转染技术在SKOV3细胞中过表达c-Myc;采用PI单染结合流式细胞术分析细胞周期的变化情况及细胞的凋亡比例；采用Western blot检测c-Myc、Aurora B、p-Histone H1的蛋白表达量。研究结果：(1)首先,通过SRB法检测了四株不同卵巢癌细胞对AZD1152和顺铂的药物敏也许感性,发现OVCAR-8细胞对顺铂最耐受,但对AZD1152最敏感；SKOV3细胞与OVCAR-8细胞正好相反,A2780细胞对两药的敏感性适中,恶性程度较高的ES-2细胞对AZD1152的敏感性与OVCAR-8类似,并且对顺铂也表现出了一定程度的耐受。PI单染结合流式细胞术也证实Aurora B拮抗剂可不同程度地诱导OVCAR-8、 SKOV3、ES-2细胞VX-770订单发生多倍体阻滞。其次,我们在卵巢癌细胞株中同时给予或序贯给予AZD1152和顺铂,评价不同给药方式下药物的合用效果。结果显示,两药同时给予OVCAR-8细胞和ES-2细胞时,合用效果不明显；而在序贯给药方式下,AZD1152可以显著增加顺铂的抗肿瘤活性,并且两药合用可显著上调细胞周期因子p21的转录和翻译水平。与此同时,AZD1152与卡铂的序贯合用也可协同抑制卵巢癌细胞的增殖,但AZD1152与紫杉醇在多种合用方案中均不存在协同效果。

微卫星多态性标记的选择参考文献报道,从UCSC人类基因组数据库获得微卫星序列。LOH分析:取10μlPCR产物与10μl甲酰胺上样缓冲液混合,95℃变性10min,冰冷5分钟。加样10μl于8%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(含7M尿素),80v电泳2.5h,硝酸银染色,观察等位片段大小和信号强度,判断结果。与正常组织相比,癌组织条带消失或相对密度减少50%以上时Dabrafenib判断为LOH。若癌组织条带增多或位移则判断为微卫星不稳定(microsatellite instability,MSI)。 免疫组织化学:标本8例BCC,26例SCC,5例正常皮肤石蜡包埋,5μm连续切片,PTCH1抗体购自北京奥维亚生物技术公司,稀释浓度为1:200,二氨基联苯胺(DAB)显色,苏木苏复染,胞内见均一的棕黄色颗粒EGFR抑制剂为阳性。400倍镜下计数5个视野或者1000个细胞,计算阳性细胞所占的百分数,染色细胞≥20%为阳性,实验数据经过SPSS13.0进行x~2验检分析。P0.05)。PTCH1高表达可通过激活Hedgehog信号通路在SCC、BCC发生过程起重要作用。 五、不同病理分期的SCC中PTCH1蛋白表达无统计学差异(P>0.05)。
目也许的对以Notch2为表面标志的胰腺癌干样细胞进行分离鉴定和组织定位,并探索其靶向治疗方法。 方法将人胰腺癌细胞株Panc-1、Bxpc-3、Aspc-1、Cfpac-1在无血清条件下培养,采用EGF, IGF-1和FGF-10诱导形成细胞球体。用免疫荧光法分别检测这4种人胰腺癌细胞株及其球体细胞、15例胰腺癌和13例正常胰腺组织标本以及吉西他滨作用后Panc-1细胞中自我更新调控因子OCT4和Nanog的表达。

进一步的结构与残基能量分解分析揭示了选择性机理的结构基础。MLN8054与Aurora-A结合诱导活化环区采取不寻常的DFG-up构象致使结合位点的疏水口袋被打开,因此,增强了MLN8054与Aurora-A的残基Va1279的相互作用。Aurora-B的残基Glu177对MLN8054有静电排斥作用,而相应的Auro没有ra-A的残基Thr217则与MLN8054形成了有利的相互作用。Aurora-A和Aurora-B的结合口袋间的差异和构象变化是决定选择性的关键因素。这些结果将有助于选择性的Aurora-A激酶抑制剂的合理设计。 p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein 购买Ivacaftorkinase, MAPK)和丝裂原活化蛋白激酶激活蛋白激酶2(MAPK-activated protein kinase2, MK2)形成的信号复合物在生理过程中与促炎症因子的产生等细胞应答密切相关。p38α与MK2的相互作用对于这个信号传导具有重要的作用。在论文的第五章中,我们将分子动力学模或者拟、域运动分析和自由能计算相结合的方法应用到MK2-p38α信号复合物的体系中,研究这两个蛋白激酶间的蛋白-蛋白相互作用(protein-protein interaction, PPI)。通过基于主成分分析(principal component analysis, PCA)的结果,我们进行了动态域运动分析,揭示了在相互作用过程中未结合状态的和结合状态的蛋白质的构象变化。

结果1. 激光共聚焦实验结果显示：UHRF2与H3、H3K9ac和H3K14ac在HEK293、LO2和HepG2细胞内均有存在共定位现象。免疫沉淀实验结果表明:UHRF2与H3K9ac在上述细胞中相结合存在相互作用。2. 免疫沉淀实验结果表明：在HEK293、LO2和HepG2细胞中PHD结构域是UHRF2与H3K9ac相互作用的关键结合很少区域,此外在HepG2细胞中除了PHD结构域外,YDG结构域也是UHRF2与H3K9ac相互作用关键结合区域。3. 免疫印迹结果显示：H3K9ac和H3K14ac在HepG2肝癌细胞中高表达。免疫组织化学结果显示：UHRF2、H3K9ac和H3K14ac在肝癌组织中高表达。4. Western blot结果表明：上那个调UHRF2后,在HEK293和L02正常细胞中H3K9ac蛋白表达增多,而在HepG2肝癌细胞中H3K9ac蛋白表达减少。同时免疫组织化学结果表明：H3K9ac蛋白在高表达UHRF2的肝癌组织较低表达UHRF2的肝癌组织少。结论UHRF2通过其PHD结构域与H3K9ac相互作用。在HepG2肝癌细胞中,过表达UH点击此处RF2下调H3K9ac蛋白的表达水平。UHRF2调节H3K9ac的分子机制有待进一步研究。
多发性骨髓瘤(multiple myeloma, MM),也称作浆细胞骨髓瘤或卡勒病,是一种血液系统恶性肿瘤,占全部恶性肿瘤的1%。尽管目前大剂量化疗伴自体造血干细胞移植以及蛋白酶体抑制剂等治疗方案研究取得了较大进展,但耐药和复发仍是MM治疗的一大难题,寻找新的抗MM治疗方案仍是临床亟待解决的课题之一。

通过HE染色法,观察待测样品对体外培养的人肺癌A549细胞和人结肠腺癌LoVo细胞的形态学影响。 3.选取健康昆明种成年小鼠,取腹腔接种S180配成癌细胞混悬液,于所有实验小鼠右前肢腋部皮下接种(0.2mL/鼠)。次日随机分为荷瘤对照组、环磷酰胺组(1Omg/kg体重)、待测样品组(TZA8001～TZA8006,5mg/kg体重、10mg/kg体重)。小鼠每隔一天给查找更多药一次,共给药4次,末次给药24h后剥离肿瘤,称取瘤重,计算各组小鼠瘤重平均值及抑制率,判断药物体内活性和毒性。 结果： 1.分子对接结果：TZA8002-TZA8006与Aurora A可能存在较强的结合能力,TZA8005与Aurora B可能存在较强的结合能力。TZA系列分子属于多靶标分子。受试分子亲脂基团侧链(乙酰苯胺基团)上增加空间很少位阻,同时使喹唑啉C-7位侧链上氨基成环有利于提高受试分子与Aurora A的结合能力。 2.体外实验结果：样品浓度在10μg/mL时,TZA8001对人肺癌A549细胞有较强的增殖抑制作用,TZA8001-TZA8007对人结肠癌细胞COLO205具有一定的细胞增殖抑制作用,TZA8001-TZA80066个样品对人胰腺癌细胞SW1990的所以增殖有一定抑制作用,其中TZA8004抑制作用较强。样品对人肺癌A549细胞、人结肠癌细胞COLO205和人胰腺癌细胞SW1990的IC50测定实验结果表明,TZA8001、TZA8003、TZA8004对人结肠癌细胞COLO205的抑制作用较好,TZA8002、TZA8005、TZA8006对人胰腺癌细胞SW1990的抑制作用较强。高浓度时TZA8001～TZA8006对人脐静脉内皮细胞HUVEC增殖有一定抑制作用。

4.对152例HCC患者的组织进行免疫组化分析,中位随访时间为51.17±21.46个月。Aurora-A高表达患者58例,低表达94例。低表达组的中位0S尚未达到,高表达组的中位0S为30个月,P<0.001；低表达组的中位RFS尚未达到,而高表达组的中位RFS为15个月,两组间比较P值<0.001。I和D1高表达组患者68例,低表达患者84例,低表达组的中位OS尚未达到,高表达组的中位OS为35个月,P
结直肠癌(colorectal cancer,CRC),又称为大肠癌,是一种常见的消化道恶性肿瘤。在世界范围内,结直肠癌的发病率在女性常见肿瘤中排第二位,在男性常见肿瘤中排第Linsitinib数据表三位,是死亡率位居第二位的癌症。世界卫生组织国际癌症研究机构(international agency for research on cancer,IARC)的统计数据显示,2008年全球结直肠癌新诊断病例达120万例,结直肠癌导致的死亡人数占全部癌症死亡人数的8%。近几十年来无,结直肠癌的整体发病率和死亡率都在逐年增高。尤其是在我国,随着国民经济收入和生活质量的提高以及生活习惯的改变,结直肠癌在中国人群中的发病率和死亡率均快速攀升,该病在我国已是发病率第三位和死亡率第五位的恶性肿瘤,逐渐成为威胁人民健康和生命的杀手。根据肿瘤的局部浸润(T)、区域淋巴结转移(N)和远处器官转移(M)这三个要素的情况,学者们提出了结直肠癌的TNM分期。

获得了对PARP抑制剂菲啶酮敏感的中国人源胰腺癌细胞JF305，这为筛选出具有自主知识产权的PARP抑制剂奠定了基础，并对后续研究提供了理论依据。
目的探讨三阴性乳腺癌的最新研究进展方法通过归纳总结国内外最新文献资料,并作进一步的综合分析结果三阴性乳腺癌被定义为雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和人表皮生长因子受体-2(EGFR-Ribociclib化学结构2)均阴性的乳腺癌,它具有独特的生物学特性及临床特征。大多数三阴性乳腺癌有基底细胞样表型的特点以及相同的临床病理特征,并且与遗传性基因BRCA1相关。三阴性乳腺癌患者不同的亚群对于特定的靶向治疗有着不同的疗效。我们评估了三阴性乳腺癌化疗联合靶向治疗的方案,系统评价了Pub Med数据库上对接受了化疗、靶向治疗、因为新辅助治疗、放疗的乳腺癌女性患者的随机临床试验报告。三阴性乳腺癌是一个对化疗敏感的实体肿瘤,单纯结合靶向药物并不能使疗效显著的提高,合理地选择病人,理性地结合靶向药物,才能使疗效获得成功。结论作为一个特殊类型的乳腺癌,三阴性乳腺癌的发病机制目前尚未知晓。临床数据显示,风险因素,如种族,年龄,绝经状态,使用激素避此网站孕药,组织学分级高,和晚期疾病独立相关与三阴性乳腺癌呈正相关。因为没有具体的一线疗法,研究人员主要致力于从不同方面,例如基因水平、激素受体、免疫调节、信号通路等进行研究。由于该病的发病率较低,目前也有只有几个临床试验。因此,我们期待在将来进行更大规模的临床试验。
[摘要]目的：研究4-氨基-1,8-萘二胺(4-ANI)对人肝癌HepG2田胞株体外的放射增敏作用并探讨其可能存在的周期作用机制。