该路线可对于终产物的吡唑环上的R基团进行变化，当R基团为哌啶环时合成的即为克唑替尼。改进的合成路线二是2，6-二氯-3-氟-苯乙酮先经还原反应生成醇、再进行Mistunobu反应、还原反应、NBS溴代反应、手性拆分、Suzuki偶联、最后脱Boc保护制得crizotinib；或者先将2，6-二氯-3-氟-苯乙酮还原、乙酰化，再经手性拆分、去乙酰化得到(1S)-1-(2，6-二selleck compound氯-3-氟-苯基)乙醇，再经Mitsunobu反应、还原、NBS溴代、Suzuki偶联、脱保护制得crizotinib。 克唑替尼的合成路线二与路线一不同之处是在Suzuki偶联对反应底物进行了改变。将路线一的线性反应变成了汇合的反应，分别合成两个重要的中间体化合物14和化合物6。首先是将化合物10在碱性条件下进行磺酰基取代反应后与4-碘代吡唑反应后PR 171得到化合物13，在二价钯催化下与双联频哪醇硼酸酯反应后得到化合物14。随后按照路线一合成化合物6后与化合物14在钯催化剂作用下发生Suzuki偶联反应再脱保护得到终产物Crizotinib（化合物1）。 本文主要是参照合成路线二对其部分反应条件进行改进，减少柱层析等复杂操作，并以较高的产率得到目标产物crizotinib。对关键中间体化合物6的合成条并且件进行了较细致的分析与研究，第一步：将3-羟基-2-硝基吡啶（化合物2）与（S）-取代苯乙醇化合物3在三苯基膦及DEAD催化条件下发生Mitsunobu反应，96%收率得到化合物4；第二步：在铁粉及盐酸的还原条件下合成化合物5，避免使用毒性大、危险性高的镍做催化剂，无需用氮气保护，反应易操作；第三步：与液溴在冰醋酸溶剂中发生取代反应得到重要中间体6，避免了文献中反应温度-15~-10℃的苛刻要求，且简化了后处理操作，产率相对较高。

其中,环境和食品中多种农兽药残留已引起人们的广泛关注。为解决一些现有常规技术达不到对多残留快速、灵敏和准确地检测,建立一种新型多农兽药残留的高通量悬浮芯片检测技术和方法,实现快速、准确、特异和高效的定量检测为什么,为建立悬浮芯片高通量的多农兽药残留检测技术平台奠定基础。 本研究以常用的4种兽药(氯霉素、克伦特罗、雌二醇和泰乐菌素)和3种农药(阿特拉津、吡虫啉和甲萘威)共7种农兽药为靶标物,BLU9931核磁共振基于间接竞争法的免疫学检测原理,改进了常规悬浮芯片技术在微球上固定抗体的方法,实现了一次检测可最多同时检出7种农兽药残留靶标物的目标;该技术还摒弃了常规悬浮芯片技术步骤繁琐、实验耗selleck产品时长的不足,通过优化和筛选实验条件,基本达到抗原抗体的完全反应,在实验中无需常规Luminex实验所必需的昂贵的滤膜板和抽滤泵,仅需普通96孔细胞培养板或酶标板即可,也无需进行反复多次的抽滤步骤;因此,检测简便、快捷,缩短时间,节省了实验成本,结果获得稳定可靠。

2. PDGF-D参与肝癌GEM耐药细胞的EMT过程,抑制PDGF-D的表达,能逆转GEM耐药细胞的EMT改变。
近年来,恶性肿瘤已经成为常见病和多发病,肺癌是恶性肿瘤中发病率最高的一种,且死亡率呈逐年上升的趋势。由于发病率LDN-193189体内和死亡率的攀升,肿瘤的诊治越来越受到重视,中医药在肿瘤的治疗中疗效得到肯定。血瘀证在恶性肿瘤患者中是较多见的,无论是肿瘤患者表现出肿块、疼痛、面色黧黑、肌肤甲错、舌质暗红、有瘀斑瘀点、脉涩等临床症状,NLG919还是血液流变学异常、血液凝固异常、微循环障碍等都体现了血瘀与肿瘤密切相关。活血化瘀药在肿瘤的治疗中应用十分广泛,多数学者认为其可以抑制肿瘤的生长,并且在抗肿瘤侵袭和转移方面发挥一定的作用。 目的：基于selleck Caspase inhibitor前期的临床和实验研究,本研究采用苏木、鸡血藤及其联合顺铂作用于Lewis肺癌荷瘤小鼠,通过观察它们的抑瘤作用、对细胞周期的影响、对与细胞增殖和细胞周期相关蛋白、基因等表达的改变,探讨苏木、鸡血藤及其联合顺铂抑制肿瘤生长的作用机制,为临床治疗肿瘤时合理应用活血化瘀药提供科学依据。

通过对不同功能区域进行修饰获得更多的HDACIs衍生物,从而筛选出对肿瘤细胞具有特异性的抑制剂。本论文结合分子对接方法对一系列新型HDACIs进行设计与合成,并对HDACIs与酶的作用机制进行了初步的分析。 根据在美国上市用来治疗T-细胞淋巴瘤的HDACIs类抗癌药品SAHA的结构和作用机理,本论文基于L-a-氨基辛二酸结构设计了金属结合区为异羟肟酸、短链脂肪酸和单酰胺的HDACI可能s系列,通过替换表面识别区域的疏水性基团,考察HDACIs的抑制活性与结构关系。本实验采用液相合成法合成了短链脂肪酸系列化合物3a-3h,异羟肟酸系列化合物5a-5c和单酰胺系列化合物6d-6fo高效液相色谱、质谱和核磁共振确定合成化合物的结构。 合成的14个目标化合物3a-3h,5a-5c和6d-6f对HDACl和HDACs的抑制活性结果显示,化合物5aINK1197 价格-5c和6d-6f对酶的抑制水平均在纳摩尔级。MTT法检测目标化合物对人乳腺癌细胞(MCF-7)、人宫颈癌细胞(Hela)和人肝癌细胞(hepG2和SMMC-7721)的抗增殖活性,表明异羟肟酸系列化合物5a-5c对肿瘤细胞显示出更好的抑制活性,而化合物5a-5c和6d-6f对肝癌细胞hepG2的抑制活性要好于SMMC-7721细胞。在100μM时,短链脂selleck化学肪酸系列化合物对SMMC-7721细胞的抑制作用显著,与其它种类细胞相比大约提高了25%左右。 为了考察抑制剂与酶相互作用特点,我们选择HDAC2进行了分子对接。所有的化合物与HDAC2的作用方式相似,5个亚甲基的连接区很好的占据了酶的活性口袋通道,抑制剂与酶表面形成了很好的疏水作用和氢键。在表面识别区的C-端引入1-萘胺基团增强了抑制剂与酶的作用,通过分子对接可知,引入的1-萘胺基团使抑制剂与酶之间形成了更多的氢键,并使结合自由能降低。

本文以2-硝基苯胺类化合物为底物,碱性条件下,以水和低级醇为溶剂,经过一个连续的还原-环合-缩合三步一锅煮工艺合成了一系列的2-芳甲基取代苯并咪唑硫醚化合物,这种合成策略为本文首次报道,操作简便,环境友好,避免了合成过程中的分离损失,目标产物收率44.5%-85.9%。 中间体及目标产物的化学结构经MS、1H NMR确证,并讨论了影响反应的主要因BYL719素,从中得到合成帕比司他与苯并咪唑硫醚化合物较佳的反应条件。
目的：多发性骨髓瘤(multiple myeloma, MM)是终末期B细胞克隆性增殖性恶性血液病疾病，在我国的发病率约为1/100000，但随着人口老龄化的增加, MM的发病率也有逐年增高的趋势。尽管近年来大剂量化疗以及新药沙利度胺、雷那度胺及硼替佐米的应此网站用在临床治疗中已取得了较好的疗效,但多发性骨髓瘤仍然存在耐药及复发,因此还需要进一步研发新的药物。唑来膦酸是第三代二磷酸盐药物，已在国内外应用于MM骨病治疗及预防，有研究发现，唑来膦酸能够通过抑制骨髓瘤细胞中焦磷酸法尼酯合成酶，进而阻止小G蛋白异戊烯化引而起骨髓瘤细胞凋亡。组蛋白去乙酰化酶抑制剂（HDACi）通过抑制组蛋查找更多白去乙酰化酶（HDAC）的活性，诱导靶细胞中组蛋白高度乙酰化，启动某些特异性基因的表达，从而阻断肿瘤细胞的生长。LBH-589是氧肟酸盐类HDACi，在实体瘤和血液系统肿瘤的临床前试验中均显示了抗肿瘤活性，包括强效的抗骨髓瘤活性。信号转导单元CD130（gp130）是IL-6受体复合物最重要的部分，IL-6在MM细胞生长以及存活中扮演着重要角色，下调CD130的表达能够影响对MM细胞生长促进作用。

蛋白激酶在多种疾病,特别是肿瘤发生发展过程中起重要作用,以其为药物靶点的激酶抑制剂则成为近年药物研发的热点。目前已有11个小分子激酶抑制剂上市,其中9个为酪氨酸激酶抑制剂。激酶抑制剂具有高选择性、副作用少的特点。已上市药物已经在慢性粒细胞白血病、非小细胞肺癌、肾细胞癌等多种疾病的治疗中显示出其较传统治疗药物的优越性,部分已成为治疗肿瘤的一线用药。本文对小分子酪氨酸激酶抑Dabrafenib制剂类新药的研发现状进行综述。
肺癌无论是发病率和死亡率均居首位,非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)占肺癌的80%,且一旦发现80%属于晚期。以铂类为基础的药物联合化疗,中位生存期(median surviual time,MST)可达10个月,然而,化疗疗效已经达到了平台期。为进一步增加疗效并降低毒selleck screening library性,以肿瘤的分子特点为基础的个体化治疗越来越受到重视,现就化疗和靶向药物的分子标记物以及在指导晚期非小细胞肺癌患者的个体化治疗方面的临床应用综述如下。
酪氨酸激酶分子信号通路异常在胃癌发生发展中发挥重要作用。c-met和c-src信号通路的激活、两者相互作用的可能机制与肿瘤血管形成的关系等一系列基础研究结果,以及酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine确认细节 kinase in-hibition,T KI)治疗胃癌的初步结论、c-met和c-src相关的T KI耐药机制等,为胃癌的个体化治疗提供了新途径。

±6.4)%,对原代卵巢癌细胞的杀伤率分别为(54.6±6.4)%和(48.3±5.8)%,说明辐照不影响NK-ustc细胞的杀伤活性(P>0.05)。辐照后NK-ustc细胞治疗组荷瘤小鼠的中位生存期为75 d,对照组为39 d(P<0.05),空白对照组小鼠全部存活。

通过以上方法初步探明了化合物通过抑制内源Aurora B激酶活性从而抑制肿瘤细胞增殖的机制。 通过western blotting的方法我们检测到化合物可以抑制VEGF/VEGFR-2激活的ERK1/2磷酸化水平。利用免疫组化的方法检测了化合物对A375裸鼠移植瘤组织中血管生成的抑制作用。以上结果表明,化合物具有同时抑制肿瘤细胞增殖及肿瘤血管生查找更多成的双重作用。 2006年,多靶点药物索拉非尼(Sorafenib)的上市,标志着多靶点靶向性治疗时代的开始。而靶点明确的药物之间联合用药的也是多靶点治疗的策略之一。据报道靶向性抑制Aurora B活性的小分子化合物AZD1152与长春新碱、柔红霉素等具有联用协同作用。因此,我们进一步对化合物S2与其它临床抗肿瘤药物的获悉更多联合应用能力进行了研究。 首先建立了联合用药在细胞水平上的筛选模型,检测了化合物与十五种抗肿瘤药物在九种肝癌细胞株中的联用能力,并选择联合能力好的Rapamycin做进一步研究。 在细胞水平上,化合物与Rapamycin联用可以抑制多种肝癌细胞株的生长。流式细胞术检测发现,化合物与Rapamycin联用可以引起Sub-BI 6727制造商G1细胞比例增长。通过western blotting检测到化合物与Rapamycin联用可以抑制Histone H3(Ser10)的磷酸化水平,初步探明了化合物与Rapamycin联用的机制。在动物水平上,使用了人类QGY裸鼠移植瘤模型检测了化合物与Rapamycin的联用能力,与Sorafenib+Rapamycin阳性对照组相比,化合物与Rapamycin表现出与之相当的联用效果以及较低的毒性。

虽然EGFR突变的肿瘤患者增加了对酪氨酸激酶抑制剂(TKI)的敏感性,但其耐药仍然是一个主要的临床问题。针对原发和获得性耐药不同的分子机制,包括应用第2代或第3代TKI,以及与EGFR下游信号通路抑制剂的组合用药等多项临床试验已经在启动和计划中。本文综述了近年来EGFR突变的NSCLC耐药机制的新进展GABA cancer和克服耐药的新策略。
肝细胞生长因子受体(mesenchymal-epithelial transition factor,MET)通路在肿瘤发生过程中具有重要作用,包括促进细胞增殖、抑制细胞凋亡、促进肿瘤血管生成、促进肿瘤细胞迁移及侵袭、转移等多个过程,涉及质膜、胞内共作LEE011制造商用因子及下游效应蛋白的协同作用。体内、外实验证实,MET与表皮生长因子受体(epithelial growth factor receptor,EGFR)之间存在复杂的交互作用,两者共同参与细胞增殖、细胞运动及下游信号通路活化等多种细胞生物学事件,其中一些与肿瘤发生、进展密切什么相关。MET有可能通过”置换”EGFR活性而参与EGFR抑制剂的耐药发生。文中综述了肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)-MET和EGFR通路在肿瘤发生、发展过程中的重要作用,讨论了两者交互作用引起EGFR抑制剂耐药的可能机制,在此基础上提出联合使用EGFR和MET靶向抑制剂在克服EGFR抑制剂获得性耐药方面的应用前景。

2.5,10.0μmol·L-1 C15与300 nmol·L-1 VCR联合作用后,可使K562/A02细胞的G2/M期比例从9.36%增加到67.57%和69.38%。C15对P-gp蛋白和ATPase的活性没有抑制作用。结论:C15可能是P-gp的非衣物型抑制剂,且具有逆转K562/A02细胞MDR的作用,该作用与其抑制细胞P-gp的外排泵功能有关。
目的总结近寻找更多年来国内外具有应用于乳腺癌骨转移潜在靶点能力的药物或制剂的研究进展。方法检索CHKD期刊全文数据库及PubMed检索系统,以乳腺癌、骨转移、靶点治疗和新型药物为关键词,检索主要分布在2009-01-2014-12的乳腺癌骨转移机制及靶点药物研究的文献。纳入标准:1)骨重塑和乳腺癌骨转移的影响因素及相互关系的研究;2)乳腺癌骨转移的潜在治疗靶点;而且3)乳腺癌骨转移的靶向药物研究;4)中医药方面的相关研究。根据纳入标准,选取43篇文献纳入分析。结果骨是乳腺癌最常见的远处转移部位。乳腺癌骨转移是包括肿瘤细胞和骨骼微环境等多种因素共同作用的结果。近年来涌现的一些新型药物和制剂,如mTOR抑制剂依维莫司、SRC抑制剂塞卡替尼和达沙替尼、组织蛋白酶K抑制剂Odanacatib、抗SclerostiTransmembrane Transporters抑制剂n抗体Romosozumab和中药等,在体外实验和临床研究中表现出了抑制肿瘤骨转移的潜力。结论对乳腺癌骨转移机制的深入研究有助于发现新的药物靶点,并将促成更多药物的开发以用于骨转移的预防和治疗。
骨质疏松症是一种骨代谢性疾病,其发生发展主要是由骨形成和骨吸收失衡造成的。一旦发生骨质疏松,可严重影响患者的身心健康及生活质量,因此,如何防治骨质疏松症是极为重要的问题。目前,骨质疏松症的治疗方法主要有非药物治疗和药物治疗两大类。

01），ND值明显降低（P<0.01）。然而，LIP+全脑缺血组大鼠在0h，1h，3h，6h各时间点海马CA1区锥体神经元均未见明显损伤，尤其是LIP0h组锥体细胞排列整齐，仅个别锥体细胞胞核固缩，无明显细胞缺失，与LIP的sham组相比，HG（0～）明显降低、ND值（154±5.93）明显升高（P<0.01），ND值（27±8.64）显著降低（P<0.01）。LIP+全脑缺血组海马CA1区锥体神经元无明显损伤，与全脑缺血组相比，HG（0～Ⅰ级）明显降低（P<0.01)，ND值（174±12.77）显著升高（P<0.01）。LIP+全脑缺血5d、7d时间点海马CA1区GLT-1的表达逐渐减少，染色逐渐变浅，与control组相比无统计学差异（P＞0.05）。P-p38MAPK的免疫组化结果显示，control组海马CA1区中未见明显的p-p38MAPK阳性表达，染色较浅，平均光密度和阳性细胞总面积分别为1.65±0.28和5486.19±3596（μm2，下同）。LIP+全脑脑缺血后各时间点海马CAI区神经元中p-p38MAPK的表达均有不同程度的上调，即刻时间点阳性细胞表达量较少，胞核着色浅。在LIP+全脑缺血30min、1h、3h时间点，阳性细胞平均光密度和总面积均有所增加，但与control组相比无统计学差异（P＞0.05）。然而，LIP+全脑缺血6h、12h和1d时间点海马CAI区p-p38MAPK的表达明显增多，以12h最为明显，胞核着色明显加深，呈深棕黄色，其平均光密度和阳性细胞总面积分别9.22±0.87和49762.16±7799，与control组相比有统计学差异（P<0.01）。LIP+全脑缺血5d后GLT-1的表达开始降低，7d时基本降到即刻水平。control组海马CA1区p-p38MAPK的表达量很少。LIP+全脑缺血后各时间点中p-p38MAPK的表达有不同程度增多，但是即刻（0h）、30min、1h、3h时间点与control组相比无统计学差异（P＞0.05）。从6h开始p-p38MAPK的表达明显增多，12h达到高峰，并持续到1d左右，与control组相比有统计学差异（P<0.01），分别为4.03±0.55、2.84±0.54、2.46±0.5、2.38±0.31。阳性细胞总面积也明显降低（P
滋养层细胞是胚胎与母体直接接触的部分,包括细胞滋养层细胞、合体滋养层细胞、绒毛外细胞滋养层细胞三个亚群。妊娠早期滋养层细胞具有高增殖能力及类似恶性肿瘤细胞的侵袭能力等独特的生物学功能。滋养细胞侵入母体蜕膜后,不被母体排斥而快速增殖是妊娠成功的关键因素之一,同时滋养细胞有节制地侵入子宫内膜基质也是正常妊娠所必需的,侵入过程异常将会导致病理妊娠,如自然流产、宫内发育迟缓、妊娠期高血压疾病等。母-胎界面微环境细胞与分子间的相互作用可以调节滋养细胞侵入子宫内膜及蜕膜。因此,母-胎界面参与调控滋养细胞生物学行为的关联分子,可以影响胚泡的正常植入和生长。

PLX3397临床试验 人类白细胞抗原G(human leukocyte antigen-G,HLA-G)基因是非经典的主要组织相容性复合物(major histocompatibility complex, MH) I类分子。以往的研究认为,HLA-G可通过多种机制诱导母胎间免疫耐受,尤其是对母胎界面中的免疫活性细胞如NK细胞、T细胞、抗原提呈细胞等起调节作用,从而使胚胎免遭蜕膜NK细胞和T淋巴细胞的攻击,维持正常妊娠。然而,我们的前期工作提示,HLA-G基因表达下降可直接导致滋养细胞的侵袭能力降低,增殖能力减弱,凋亡增加,从而可能导致一系列病理妊娠如子痫前期、胎儿生长受限、复发性自然流产等的发生。但是,HLA-G基因与病理妊娠发生的具体机制并不明确。丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated Alectinib供应商 protein kinase, MAPK)是细胞内重要的信号转导者,主要包括细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase, ERK)、c-Jun N-端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)和p38MAPK等成员,参与调节细胞的增殖、分化、凋亡以及细胞的黏附与迁移。已有文献报道,胎盘组织中p38MAPK广泛分布,p38MAPK的激活与表达状态的改变可能与子痫前期等病理妊娠的发病密切相关。本研究应用RNA干扰技术抑制HTR-8/SVneo细胞中HLA-G基因的表达,研究HLA-G表达降低对滋养细胞生物学行为、MAPK及磷酸化MAPK关键蛋白激酶表达的影响,进一步阐明子痫前期等病理妊娠的发病机制,并为其治疗提供新思路。

Small Molecule Compound Library 第一部分化学修饰的siRNA体外下调滋养细胞HLA-G的表达 目的体外沉默HTR-8/SVneo滋养细胞HLA-G的表达。 方法利用siRNA干扰技术,转染HTR-8/SVneo滋养细胞后,分别用荧光oligo转染细胞、RT-PCR、Western-blot检测滋养细胞HLA-G的表达水平。 结果HTR-8/SVneo滋养细胞荧光转染效率可达70%-90%。HLA-G mRNA表达：实验组为0.26±0.08,阴性对照组为0.71±0.11,空白对照组为0.79±0.07。实验组与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P0.05)；实验组HLA-G mRNA表达抑制率为(69.8±6.3)%,阴性对照组HLA-G mRNA表达抑制率为(14.9±2.2)%,空白对照组为0。HLA-G蛋白表达：实验组为0.20±0.15,阴性对照组为0.75±0.12,空白对照组为0.76±0.21。实验组与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P0.05)；实验组HLA-G蛋白表达抑制率为(81.1±14.4)%,阴性对照组HLA-G蛋白表达抑制率为(18.0±7.7)%,空白对照组为0,实验组与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P0.05)。实验组细胞数目较阴性对照组和空白对照组明显减少。转染48h后各组细胞的增殖能力的比较,实验组为0.19±0.08,阴性对照组为0.26±0.08,空白对照组为0.27±0.09。实验组与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P0.05)。实验组细胞增殖能力与阴性对照组或空白对照组相比显著减少。转染72h后各组细胞的凋亡率的比较,实验组为(19.5±0.47)%,阴性对照组为(15.8±0.83)%,空白对照组为(16.3±0.92)%。实验组与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P0.