05),p-P38MAPK和p-NF-κB P65的表达显著升高(P<0.01)。与H组比较,H+FTY720组与H+SB组的细胞凋亡率显著升高(P<0.05,P0.05),p-P38MAPK和p-NF-κB P65的表达显著降低(P<0.05,P<0.01),且细胞凋亡率与FTY720浓度呈正相关(P
目的观察褪黑素对LPS诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)炎症的保护作用及作用机制。方法体外培养SD雄性大鼠PASMCs,随机分为5组:空白对照组(N组)、脂多糖(LPS)组、脂多糖+褪黑素(LPS+MLT)组(0.5mmol/L、1.0mmol/L)、LPS+P38MAPK抑制剂(SB203580)(LPS+SB)组(5μmol/L)。CCK-8试验检测褪黑素对PASMCs的药物毒性;半定量RT-PCR分别检测mRNA水平丝裂原活化蛋白激酶(mitogen

activated protein kinase,MAPK)通路中P38MAPK和核因子κB(nuclearactor-κB,NF-κB)的表达量;Western blot法检测P38MAPK和NF-κB以及磷酸化P38MAPK和NF-κB的表达量。结果在实验设计的浓度内,褪黑素对PASMCs无药物毒性不良反应(P>0.05)。与LPS组相比,LPS+MLT和LPS+SB抑制MAPK信号通路中的磷酸化P38MAPK和磷酸化NF-κB的表达(P<0.01),且随褪黑素的剂量的增加而降低(P<0.01)。结论褪黑素抑制MAPK信号通路中P38MAPK和NF-κB的激活,减轻LPS诱导的PASMCs炎性反应。
目的:观察脂肪因子Chemerin是否参与调节巨噬细胞凋亡,并探讨其可能的机制。方法:100nmol/L佛波酯(PMA)诱导THP-1单核细胞分化为巨噬细胞,随机分组,在含1%胎牛血清的DMEM培养基中,加入100mg/L乙酰低密度脂蛋白及10mg/L胆固醇乙酰转移酶抑制剂-58035,促进游离胆固醇(FC)聚集。在不同浓度重组chemerin的作用下与FC聚集的巨噬细胞共孵育。以JNK阻断剂和P38MAPK阻断剂进行干预,Annexin-V和PI双染后用流式细胞仪检测巨噬细胞凋亡。结果:重组人Chemerin能显著增加巨噬细胞凋亡率,并且这种作用随chemerin浓度的增加而增加[巨噬细胞凋亡率对照组(19.04±0.39)%、重组chemerin0.1μg/L组(22.77±0.86)%、10μg/L组(26.37±1.06)%、500μg/L组(33.44±0.87)%]。以JNK阻断剂和P38MAPK阻断剂干预后,重组chemerin组巨噬细胞凋亡率下降幅度高于中和chemerin组[重组chemerin组和中和chemerin组应用JNK阻断剂前后的差值分别为(9.85±0.34)%和(6.13±1.09)%;重组chemerin组和中和chemerin组在应用P38MAPK阻断剂前后的差值分别为(11.82±0.60)%和(7.65±0.83)%]。结论:重组人Chemerin能显著增加巨噬细胞凋亡,并且JNK及P38MAPK信号通路参与此凋亡过程。
丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated

RNA Synthesis抑制剂 那个 protein kinase,MAPK)信号通路是真核生物信号传递网络中的重要途径之一,在多种细胞过程中发挥关键性的作用,包括细胞的恶性转化、肿瘤的发生发展、肿瘤的耐药等方面。乳腺癌是女性群体中常见的恶性肿瘤。据估计,妇女的一生中,每8人就有1人会被诊断为乳腺癌,并且,其发病率呈逐年上升趋势[1]。乳腺癌是一类高度异质性的
p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated 无 protein kinases,MAPKs)级联是细胞内重要的信号转导系统。研究表明,p38 MAPK通路与炎症反应的发生存在密切关系,是炎症等慢性疾病治疗的重要靶标。近十几年来已有多种化学结构类型的p38α抑制剂被报道,部分活性化合物已进入临床试验研究。本文针对小分子p38

MAPK抑制剂的结构特点、药理活性及相关临床评价研究进行综述。
目的:为开发新型镇咳、祛痰药物提供参考。方法:以”镇咳药”"祛痰药”"研究进展”"Antitussive”"Expectorant”等为关键词,组合查询2003-2014年中国知网、万方、Pub Med、Scopus等数据库中的相关文献,将镇咳药物按受体的不同进行分类分析,而祛痰药物则按作用机制的不同进行归纳。结果:共查询到相关文献80余条,有效文献29条。其中具有良好开发前景的新型镇咳药物主要有速激肽受体拮抗药、P2X受体拮抗药、选择性大麻素受体激动药、瞬时受体电位香草酸亚型1受体拮抗药、p38丝裂原活化蛋白激酶抑制剂等;祛痰药物的研究仍局限于黏液溶解药、恶心性祛痰药、黏液润滑药3种。结论:目前,新型的镇咳药物已逐渐向疗效更广、更具受体选择性的方向发展,而祛痰药物则未见有较大的突破。
重症急性胰腺炎(SAP)是一种常见的重症急腹症:发病突然,病情急且危重,并发症多,病死率高,预后较差。细胞因子与其发病机制有着十分密切的关系。研究证实,中医药在调节SAP病程中相关细胞因子有着显著效果。研究中医药对SAP病程中细胞因子的影响及作用机制,将为SAP的预防和诊治带来新的契机。
目的研究白细胞介素10(IL-10)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的大鼠心脏成纤维细胞(CFBs)增殖、向肌样成纤维细胞(Myo Fbs)转化的影响及其作用通路。方法原代培养SD乳鼠CFBs,应用第2~4代,分为对照组、IL-10刺激组、TGF-β1刺激组、IL-10与TGF-β1共同刺激组(IL-10预处理后加入TGF-β1)。每个刺激组设3个复孔,所有实验重复3次。四氮唑盐比色法检测细胞增殖,免疫细胞化学染色检测增殖细胞核抗原表达,免疫细胞化学染色及Western blot检测α-平滑肌细胞肌动蛋白(α-SMA)和ERK1/2、P38激酶磷酸化蛋白的表达。结果与对照组比较,TGF-β1(10μg/L)能显著刺激CFBs增殖及表型转化(α-SMA表达)(P<0.

经热和bFGF诱导后的表皮细胞出现蛋白、形态、功能和基因水平的改变。免疫细胞化学检测显示细胞诱导后CK19和β1整合素染色呈阳性;流式细胞仪检测结果显示CK19和β1整合素阳性率在诱导前分别为0.00%和0.00%,诱导后7d和14d

CK19阳性率增加到83.01%和90.42%,β1整合素阳性率增加到83.63%和93.88%;Western Nutlin-3a供应商 bloting检测显示,表皮细胞在去分化诱导前CK19和β1整合素均无表达,诱导后7d和14d CK19和β1整合素出现不同程度的表达。Giemsa染色和透射电镜观察显示细胞诱导后形态发生改变,表现为体积减小,细胞器数目减少,核浆比增大。增殖和再分化能力的改变体现在诱导后的表皮细胞能形成克隆,在滋养层培养条件下可以形成复层生长,并能够在体外构建出包括基底层和基底上层在内的表皮结构。基因水平的改变表现在与角质化相关的基因下调和与有丝分裂相关的基因上调。3.体外激活β-catenin通路可以促使表皮细胞表达CK19和β1整合素,克隆形成和进入细胞分裂周期;而通过siRNA抑制β-catenin的表达可以阻断由热和bFGF诱导的去分化过程。免疫荧光染色显示,Smad4敲除小鼠表皮细胞核内β-catenin表达增强,CK14和Ki67表达阳性细胞大量多层分布于表皮组织内。4.MSCs和SGCs在体外均呈克隆样生长;MSCs表达CD29、CD44、CD71、CD105和CD166,不表达造血干细胞标志CD34和CD45,以及汗腺细胞标志CK19和CEA。加入诱导培养基后MSCs可以向骨和脂肪细胞分化;培养的SGCs表达CK19和CEA;SGCs经高温损伤后,大多数细胞的细胞间连接消失;BrdU或GFP标记的MSCs和损伤的SGCs共培养5d后,部分MSCs表达汗腺细胞标志CK19或CEA;发汗实验和形态学观察证实将具有汗腺细胞表型的干细胞移植于裸鼠创面后,能显著促进受损汗腺的修复与再生。人体移植试验表明,经种植诱导的汗腺细胞后,病人创面愈合部位呈现出汗功能,对照部位发汗实验阴性,形态学检测显示创部真皮浅层经汗腺移植后有大量CEA阳性细胞,结构类似正常汗腺组织。汗液成分分析结果显示治疗处收集的汗液与正常皮肤处收集的汗液具有类似的pH值,渗透压和化学组分。

结论:1.在特定损伤环境和特定因素的诱导下,已分化的表皮细胞可去分化为表皮干细胞或表皮干细胞样细胞。2.表皮细胞的去分化过程与β-catenin/Wnt信号通路有关。3.骨髓间充质干细胞可以在体外成功诱导为汗腺细胞,经移植后,在创面能形成具有功能的汗腺组织。
目的：探讨喜树碱类衍生物与celecoxib联合用药的体外和体内的抗肿瘤作用及机制，同时观察celecoxib对CPT-11引起裸鼠腹泻及体重的影响。 以及 方法：以MTT法检测结肠癌细胞系在联合应用celecoxib后对喜树碱及其衍生物的化学敏感性的改变；流式细胞术检测celecoxib与喜树碱联合用药后HT-29细胞的凋亡比率和细胞周期的变化；Western Blot法检测环氧合酶-2(COX-2)以及凋亡相关蛋白(Bcl-2、Caspase-3、P53)的表达。以HT-29细胞裸鼠移植瘤模型观察celecoxib与CPT-11联合应用的体内抗肿瘤作用，并且观察celecoxib对CPT-11引起腹泻及体重减轻的影响。 结果：Celecoxib可以显著降低三种喜树碱类衍生物对四种人结肠癌细胞系的IC_(50)值，并且这种降低的程度与COX-2的表达密切相关。在HT-29细胞，celecoxib和CPT的联合应用使其凋亡率达到51.4％，而CPT单独使用的凋亡率为24.4％(p＜0.01)。同时，celecoxib可以使CPT处理组的G0／G1期细胞增加并降低S期和G2／M期的细胞比例(p＜0.01)。Celecoxib和CPT的联合应用可以降低COX-2和Bcl-2的表达，增加Caspase-3和P53的表达。HT-29细胞裸鼠移植瘤实验中，celecoxib(60mg／kg)与CPT-11(25mg／kg)的联合应用使肿瘤生长明显抑制，其抑制率为78.77％(与对照组相比(p＜0.01)，与CPT-11(25mg／kg)组相比也有显著差异(p＜0.05)。同时celecoxib可以明显减轻CPT-11引起腹泻症状，降低其腹泻评分(p＜0.01)，并降低腹泻的发生率(p＜0.05)；另外，celecoxib可以明显缓解CPT-11引起的裸鼠体重减轻(p＜0.05)。

Ruxolitinib半抑制浓度 结论：Celecoxib可以增强CPTs的体外、内的抗肿瘤活性，这种作用可能与增加细胞凋亡和细胞周期阻滞作用有关。另外celecoxib可以减轻CPT-11引起的腹泻，并缓解CPT-11引起的体重下降。 恶性肿瘤的生长和转移与肿瘤区域的血管密切相关，肿瘤区域的新生毛细血管是肿瘤赖以生长和生存的物质基础，肿瘤细胞需要新生血管为迅速生长的肿瘤提供营养和排出代谢废物。早在七十年代初就有人提出把抑制肿瘤血管形成作为肿瘤治疗的一个途径，随后这种以肿瘤血管为靶标的治疗策略——肿瘤血管靶向治疗(Tumor vascular targeting therapy)逐步发展成为当今肿瘤领域研究的主攻方向之一。因此肿瘤血管生成的分子基础也成了当今肿瘤生物学与分子生物学研究中最活跃的领域。大量研究表明，VEGF／VEGF-R信号传导通路在肿瘤血管生成中占有非常重要的地位，本研究的第二部分就是围绕血管生成过程中的关键性的信号传导通路展开，以寻找新型的血管生成抑制剂。本部分内容包括两个方面，其中第一方面研究了新型的VEGF-R抑制剂——苯胺酞嗪类化合物FVE-3的抗血管生成作用。第二方面探讨了RXR选择性激动剂LGD1069的抗肿瘤作用以及对肿瘤诱导的血管生成的影响。结果如下： 一、新型苯胺酞嗪类化合物FVE-3的抗肿瘤及抗血管生成作用 1、FVE-3的抗肿瘤作用 在体外研究中，FVE-3可抑制多种不同来源的肿瘤细胞的生长，如人结肠癌细胞HT-29、HCT-8，人卵巢癌细胞A2780，人胃腺癌细胞BGC-823，人非小细胞肺癌细胞A549，人宫颈癌细胞HeLa，人乳腺癌细胞MCF-7，人黑色素瘤细胞A375，人脐静脉内皮细胞HUVEC和ECV／304以及小鼠黑色素瘤B16、B16-BL6以及转染MEKK1基因的细胞m1B16及空载体细胞pB16等，MTT法测得其半数抑制浓度IC_(50)在2.25～9.17μmol／L之间。用SRB方法观察了FVE-3对三株人结肠癌细胞系HT-29、HCT-8和HCT-116细胞生长的影响，结果表明FVE-3可不同程度地抑制这三种结肠癌细胞系的生长，其半数抑制浓度GI_(50)在1.06～4.3μmol／L之间。同时FVE-3还可以剂量依赖性地抑制结肠癌细胞HT-29和HCT-8的集落形成能力。体内研究表明，FVE-3对小鼠Lewis肺癌及肝癌H22的生长均有一定的抑制作用，并呈一定的剂量效应关系，抑制率分别为28.0％(p＜0.05)、53.6％(p＜0.01)和45.1％(p＜0.05)、50.4％(p＜0.

健康对照组与初治类风湿关节炎患者外周血淋巴细胞P-糖蛋白的相对荧光强度(RFI)平均值相比,类风湿关节炎患者P-gp的表达明显增加,两组比较差异有统计学意义(P0.05)；在2ng/ml的IL-6刺激0h、48h、72h后,各时间点P-gp的表达两两比较,72h时和0h及48h的P-gp的表达差异有统计学意义(P0.05)但罗丹明123的荧光强度呈下降趋势,在20ng/ml的IL-6刺激0h、48h、72h后,罗丹明123的荧光强度逐渐下降,差异均有统计学意义(P0.05),在72h,0、2、20ng/ml/ml的IL-6刺激后,罗丹明123的荧光强度逐渐减弱,差异有统计学意义(P3.2),受累的关节以大关节(肘、肩、膝关节)为主,代表疾病活动度的能量多普勒超声血流信号积分明显高于其他患者。

结论 1.与健康对照组相比,RA患者外周血淋巴细胞P-糖蛋白的表达水平明显增加,并且与疾病的活动度(血沉、C-反应蛋白、DAS28)有相关性,表明P-糖蛋白介导MDR,与疾病的活动度有关； 2.RA外周血淋巴细胞中P-gp的表达水平的增高与IL-6有一定的时间依赖性。随着IL-6的浓度增加时,P-gp表达水平呈增高,且低浓度IL-6刺激时较明显； 3.IL-6刺激后,RA外周血淋巴细胞中P-gp的功能增强有一定的时间依赖性及浓度依赖性； 4.RA患者中P-gp不仅在淋巴细胞膜上表达,而且在上清液中也有部分P-gp的分泌,并且IL-6调控P-gp分泌水平增高。
背景 急性高原反应（acute mountain sickness,AMS)是急进高原数小时对高原应激环境所做出的一种短暂的适应性反应，是指人体在进入高原环境以后的各种功能在神经体液的调节过程中所显现的临床症状，以使机体的各种生理学功能在此基础上达到新的平衡状态。急性高原反应的症状包括头痛、心慌、食欲减退、倦怠、恶心、手足麻木和抽搐等。AMS如早期发现，症状可以控制，发现晚病情则迅速加重，导致脑肺水肿甚至威胁到生命[1]。急性高原病的发病率与缺氧程度和高海拔上升速度有密切关系[1]。当上升至海拔高度为4000m的高原时，上升速度为91m/h，急性高原病的发病率为54%；以1268m/h的速度进入高原时，其发病率上升至73%；当上升速度达到1647m/h时，急性高原病的发病率高达至89%[2]。

更多 购买KRX-0401 对AMS进行及时干预非常必要，目前对于AMS的预防尚无较理想的方法和检测手段。本研究观察受试者急进海拔4000m高度48h前后单个核细胞中HIF-1信号通路中的相关信号分子：低氧诱导因子1(hypoxia inducing factor1,HIF-1)、p38MAPK、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)以及核转录因子RelA亚基(nuclear factor-KappaB RelA)的表达变化及它们与AMS的发生以及发生程度之间的关系，为AMS的早期防治提供实验依据和理论依据。 目的 通过观察正常人单个核细胞中HIF-1α、核转录因子RelA亚基、p38MAPK和VEGF在急进高原前后表达水平的变化，以及与AMS发生率的相关性分析，探讨HIF-1α和RelA以及p38MAPK和VEGF在AMS发生中的作用及机制。 方法 对某部队赴青海省玉树抗震的官兵分别于进入高原前后48h采集外周血，提取外周血中单个核细胞中的蛋白和mRNA，使用Western blot方法检测其VEGF和HIF-1α蛋白表达水平，逆转录PCR的方法检测p38MARK、RelA及HIF-1α三者mRNA的表达水平。GB1098291《急性高原反应的诊断和处理原则》作为本课题AMS的诊断依据。进一步对核转录因子RelA、p38MARK、VEGF和HIF-1α四种指标的基因表达与AMS发生的相关性进行统计学分析。将所得数据以X S进行表示，运用SPSS17.0软件进行统计学分析，各组定量资料先进行正态性检验且均呈正态分布，进而根据资料设计采用配对t检验进行差异性分析，应用pearson方法做各指标的相关性分析，用spearman方法做指标与AMS的相关性分析。以＝0.05作为检验水准。

结果 人体外周血单个核细胞中HIF-1α、P38MARK和RelA三者mRNA表达水平及HIF-1α和VEGF的蛋白表达水平与急进高原前相比进入高原以后均显著性增高（p 0.05）。HIF-1α及VEGF蛋白表达水平与AMS的发病程度高度相关，相关系数分别为0.875和0.675（p
第一部分JAZF1基因表达上调对饱和脂肪酸作用的肝细胞促炎因子产生的影响及其机制 PD173074制造商 目的：探讨JAZF1表达上调对脂肪变性肝细胞促炎因子产生的影响及其可能的分子机制。 方法：通过利用一定浓度饱和脂肪酸作用大鼠源性正常肝细胞，构建肝细胞脂肪变性模型；运用JAZF1过表达腺病毒载体Ad-JAZF1上调肝细胞JAZF1表达；利用甘油三酯氧化酶法检测细胞甘油三酯含量；应用CCK-8法检测细胞活率；通过RT-PCR检测肝细胞JAZF1及促炎因子TNF-α、MCP-1、IL-8的mRNA表达水平；采用ELISA检测不同处理组肝细胞TNF-α、MCP-1及IL-8的蛋白分泌程度；通过利用western blot检测P-JNK/JNK、P-P38MAPK/P38MAPK、P-ERK/ERK、IKBα、JAZF1及内参β-actin的蛋白表达水平。 结果：给予肝细胞不同浓度饱和脂肪酸作用不同时间，肝细胞促炎因子TNF-α、MCP-1及IL-8的表达和分泌呈现浓度、时间依赖性升高（P<0.01或P<0.05或P<0.01）；然而，饱和脂肪酸作用肝细胞的同时，分别给予细胞JNK、P38MAPK、ERK及NF-κB通路特异性抑制剂之后，P-JNK、P-P38MAPK、P-ERK的磷酸化水平降低，而IKBα蛋白表达明显升高（P<0.01或P<0.001），并且肝细胞TNF-α、MCP-1及IL-8的表达显著被抑制（P<0.05或P<0.01）。其次，利用Ad-JAZF1腺病毒感染饱和脂肪酸作用的肝细胞后，细胞的JAZF1mRNA及蛋白表达均明显增高（P<0.01或P<0.001），而TNF-α、MCP-1及IL-8的表达显著降低（P<0.05或P<0.01），并且P-JNK、P-P38MAPK、P-ERK的磷酸化水平降低（P<0.05或P<0.01)，NJ组小鼠血浆TC低于NC组(P<0.05或P0.

本文提出,肿瘤是一种蛋白质组病,并根据肿瘤比较蛋白质组、表达蛋白质组、功能蛋白质组和结构蛋白质组研究进展,从肿瘤发生发展过程中蛋白质(组)表达水平及状态、蛋白质翻译后修饰、蛋白质相互作用及网络调控等三个方面进行阐述.该观点的提出,将为肿瘤发病机制的研究开辟新的领域,为肿瘤的诊断(如生物标志物筛选)和筛选(如药物新靶标)提供新的思路,具有重要的科学意义和临床应用价值.
由于心肌坏死后局部组织缺血、缺氧,引起氧化应激和炎性反应,致使移植干细胞的生存和分化能力受到一定影响。胰岛素样生长因子-1、肝细胞生长因子、骨形态发生蛋白-2等细胞因子可通过与其受体结合,激活P13-K/Akt信号转导途径,从而介导干细胞在移植微环境中的存活,有利于移植干细胞向心肌分化。
目的:拟通过调节糖原合酶激酶3(GSK-3)活性,检测蛋白磷酸酯酶2A催化亚基去甲基化水平(dmL309-PP2AC)以及相关分子的变化,进一步阐明GSK-3调节PP2A活性的分子机制。方法:将选用小鼠神经瘤细胞株,给予PI3-K抑制剂
Objective:We

previously reported that inhibition of mitochondrial permeability transition pore(mPTP) is involved in the neuroprotection induced by sevoflurane postconditioning(SPost).However, the upstream mechanisms remain unclear.In the present study,we examined the hypothesis that the neuroprot…
Glycogen synthase kinase 3b (GSK-3b) is a serine/threonine protein kinase involved in the modulation of the inflammatory response. Dysregulation A-1210477小白鼠 of GSK-3b has been implicated in the pathogenesis of several diseases including sepsis. Here, we investigate the effects of two chemically distinct

GSK…
Diabetes and oxidative stress:preventive role of physical exercise Mustafa Atalay, Niku Oksala, Jani Lappalainen, Osmo Hanninen, Chandan K. Sen ( University of Ruopio, Finland. Mustafa. [email protected]) Oxidative stress, an imbalance between the generation of reactive oxygen species and antioxidant…
Effect of ganoderma lucidum spores 所以 powder on TNF – α and ET -1 in the hippocampi of epilepsy rat Shuang Zhao ,Shu – qiu Wang ,Sheng – chang Zhang ,Xiao – ru Ma ,Ting Zhang ( Postgraduate of Grade 2003,Jiamusi University, Jiamusi 154007, China; Department of Pathophysiology Basic Medical College o…
目的:探讨2型糖尿病对舒芬太尼后处理及GSK-3β蛋白抑制剂SB216763减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤作用的影响方法:健康雄性清洁级SD大鼠80只,体重1 80-200g,随机分为糖尿病造模组和正常组各40只。2型糖尿病模型的制备采用高脂饲料喂养诱导胰岛素抵抗加一次性腹腔注射链脲佐菌素35mg/kg的方法。正常组大鼠予以普通大鼠饲料,各饲养8周后进入实验,各随机分为4组,共8组(n=6):非糖尿病假手术组(NDM-S组)、非糖尿病缺血再灌注组(NDM-IR组)、非糖尿病舒芬后处理组(NDM-SP组)、非糖尿病SB216763处理组(NDM-SB组)、糖尿病假手术组(DM-S组)、糖尿病缺血再灌…
Introduction Myocardial ischemia reperfusion injury can be reduced by several interventions,including

不 ischemic preconditioning(IPC) and volatile anesthetic preconditioning,in animal hearts and human hearts. However,recent studies have indicted that several pathological conditions,such as
目的:最近的研究表明TRIM家族蛋白MG53在心肌保护中发挥重要作用,但是很少的研究探讨MG53在七氟烷后处理抗心肌缺血再灌注损伤中的作用。本文试图研究MG53在大鼠I/R模型中七氟烷后处理心肌保护作用中的作用和机制。方法:应用Langendorff系统,离体大鼠心脏经历40min全心缺血120min再灌注,后处理组在复灌开始10给予2.5%七氟烷后处理。记录左心室血流动力学参数,测量心肌梗死面积,心肌MG53,Akt,p-Akt,ERK1/2,p-ERK1/2),GSK3β,p-GSK3β表达量。结果:相比对照组,七氟烷后处理组血流动力学明显改善,梗死面积明显减少,并且这种变化可以被LY29…
Traumatic brain injury (TBI) is often caused by the accidents to damage the brain. TBI may induce glutamate excitotoxicity and lead to neuronal and glial cell death. In this study, we investigated the mechanism of cell death during secondary damage of TBI and the protective effect of resveratrol. No…

6%，而敏感性也较高，为81.3%；以交叉验证的方法进行可靠性分析，获取ROC的曲线下面积，PIN方法具有最大的ROC曲线下面积，即相比较具有最高的可靠性。 随后，我们从GEO数据库中筛选出鸡感染禽流感的四组数据。分别为GSE32378，鸡感染H5N1；GSE31476，鸡感染H1N1；GSE31505，鸡感染H9N2；GSE31506，鸡感染H5N2。选取PIN方法进行差异通路和差异表达基因的预测，并对这些差异表达基因进行染色体定位、GO注释富集分析，映射到蛋白质相互作用网络进行分析。可知筛选四个数据集得到的差异基因，在染色体定位分布上有较小差异；在GO注释富集分析中差异较小；蛋白质相互作用网络的拓扑分析结果显示，四组数据中获得的hub蛋白不同，其对应得到的重要基因也不同；在通路相互作用网络分析中，不同的流感感染过程重要的基因也不同。鸡感染H1N1和H5N2过程中有共同的重要基因CBL和GOT1；鸡感染H9N2和H5N2过程中有共同的重要基因ATP2A2。由我们的统计结果显示，在鸡感染这四种禽流感病毒的过程中，核糖体、氧化磷酸化、嘌呤代谢、Wnt信号通路、TGF-β信号通路及Jak-STAT信号通路都起到了重要的作用。

最后，我们还从GEO数据库中选择人、猪、鸡感染H1N1三组数据，分别为GSE31524，人感染H1N1；GSE35738，猪感染H1N1；GSE31476，鸡感染H1N1。采用上面4组数据同样方法分析处理，可知筛选获得的差异基因在生物过程、分子功能及细胞组成的GO注释富集分析中差异较大；蛋白质相互作用网络的拓扑分析其hub蛋白不同，其对应得到的重要基因也不同；针对通路相互作用网络分析，不同的物种感染H1N1流感过程连接多条通路的重要基因也不同，但MAPK信号通路和Jak-STAT信号通路在H1N1的感染中起着重要的作用。
5-羟甲基糠醛（5-hydroxymethylfurfural，简称5-HMF），分子式为C6H6O3，纯品有甘菊花味，为暗黄色液体、粉末或针状结晶，易液化，是一种呋喃类化合物，主要来源于糖的受热分解和美拉德反应，广泛存在于含糖量高的植物、热加工食品和中药中。近年来研究表明，在少量摄入量情况下，5-HMF对人体不存在严重的健康风险，且它的生物活性逐渐被发掘，但对其生理活性的考察还不全面、关于其作用机制研究更是少有报道，因此本文以前人的研究为基础，在细胞分子水平上模拟体内环境，对5-HMF的抗氧化活性和抑制肿瘤细胞增殖活性进行考察，并探讨其作用机理。

C646分子量 1.本实验采用ABTS法和DPPH法初步研究发现5-HMF具有清除ABTS+自由基和DPPH+自由基的能力；进一步通过建立AAPH诱导红细胞氧化损伤模型，发现5-HMF能够缓解氧化损伤所导致的红细胞溶血，并呈现一定的剂量依赖性，且5-HMF是通过提高抗氧化系统中SOD、CAT和GPx的酶活性、减少有害物质MDA的产生并阻止体内自由基（ROS）的侵袭而从源头上切断脂质等的过氧化反应，进而维持细胞结构和功能的完整性。上述结果表明5-HMF具有抗氧化活性。

并且 可能 2.采用MTT法研究5-HMF对5种常见肿瘤细胞和2种正常细胞的抗增殖活性，发现5-HMF对各种细胞增殖的抑制效果依次为：L02在过去的几十年中，食物过敏的发生率在全世界范围内逐年上升。食物过敏常常会引起皮肤、消化道和呼吸道等部位的病理反应，严重的还会威胁到患者的生命。目前，通过开发新型抗过敏天然活性物质来预防或治疗食物过敏正逐渐成为一个新的研究热点。紫菜多糖（porphyran）是一类存在于紫菜中的硫酸多糖，具有免疫调节的活性，并且能够预防和治疗自身免疫性疾病。龙须菜寡糖（Gracilaria lemaneiformis oligosaccharide）是通过菌株与龙须菜共培养直接制备的寡糖。目前关于紫菜多糖和龙须菜寡糖抗过敏方面的研究较少，所以探究紫菜多糖和龙须菜寡糖的抗食物过敏功效，并深入研究其抗食物过敏机理，对于开发新型原料药或功能性食品具有重要的意义。 本研究通过水提、低压浓缩、醇沉、DEAE-cellulose52离子柱层析等方法获得高纯度紫菜多糖，其总糖含量为98.85%，3,6-内醚半乳糖含量为6.25%，硫酸根含量为14.26%，糖醛酸含量为14.02%，蛋白含量为1.2%。通过离子色谱鉴定其含有的单糖主要为半乳糖，含量为60.09%。 通过发酵、超滤、Superdex Peptide HR10/300柱层析等方法获得高纯度龙须菜寡糖，其总糖含量为78.85%，还原糖含量为17.80%，蛋白含量为0.2%。通过离子色谱测定纯化的龙须菜寡糖中四糖含量为48.47%，六糖含量为25.69%。 从拟穴青蟹中纯化得到原肌球蛋白（tropomyosin，TM），利用TM作为过敏原建立小鼠食物过敏模型，以评价紫菜多糖和龙须菜寡糖的抗过敏效果。动物实验结果显示，第二次腹腔注射TM后，TM组小鼠血清IgE的含量是PBS组的4-9倍，说明小鼠已致敏，而注射紫菜多糖和龙须菜寡糖后小鼠血清IgE和IgG1的水平均能显著降低， IgG2a的水平均能显著升高；第十次灌胃后，TM组小鼠粪便中组胺含量上升为187.48μg/mL，而紫菜多糖组小鼠粪便中组胺含量下降为32.

05);OA+SB组PGC-1α表达减低(P
丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)是细胞内的一类丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,它存在于大多数细胞内,是真核细胞转导细胞外信号到细胞内引起细胞反应的一类重要信号系统。p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen activated protein kinase,p38MAPK)信号通路为
目的分析肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和骨桥蛋白(OPN)在类风湿关节炎滑膜成纤维细胞中表达的相互影响及可能的信号转导途径。方法采用牛源性Ⅱ型胶原配合不完全弗氏佐剂制造胶原诱导性关节炎(CIA)模型,取正常对照组和模型组膝关节滑膜,胶原酶消化法分别培养滑膜成纤维细胞(SFs),分成正常对照组、模型组、模型组+脂多糖(LPS)、模型组+LPS+p38途径抑制剂(SB203580),观察SFs中OPN

或者 mRNA的变化,分析TNF-α与OPN表达的相互影响及可能的信号转导途径。结果模型组细胞加入LPS刺激后OPN mRNA表达较模型组明显增多(P<0.01),予SB203580后,OPNmRNA的表达显著减少,4组间比较差异显著(P
目的:探讨牛膝含药血清对骨关节炎软骨细胞P38丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路的影响。方法:将20只雄性新西兰大白兔随机分为空白对照组、模型组、P38阻断剂组及含药血清组,每组5只。分组后含药血清组大白兔以牛膝水煎剂灌胃(2.5 g.kg-1),其余各组以等量生理盐水灌胃,每天2次,共3 d。3 d后静脉采血,分别配成10%含药血清和10%空白血清的DMEM培养液保存备用。除空白对照组外,其余各组大白兔均采用Hulth法行兔膝骨关节炎造模,空白对照组行假手术。造模成功后处死实验兔分离兔膝关节软骨进行软骨细胞培养,对空白对照组、模型组的第3代软骨细胞以空白血清进行干预,P38阻断剂组以SB203580进行干预,含药血清组以牛膝含药血清进行干预。血清干预结束后,分别采用免疫荧光技术和Western

时间 Blot技术检测各组软骨细胞磷酸化P38丝裂原活化蛋白激酶及Ⅱ型胶原蛋白含量。结果:①免疫荧光检测结果。各组细胞均有磷酸化P38丝裂原活化蛋白激酶阳性表达,其中模型组呈强阳性表达,P38阻断剂组及含药血清组略弱,空白对照组最弱;各组细胞均有Ⅱ型胶原蛋白阳性表达,其中空白对照组呈强阳性表达,P38阻断剂组及含药血清组略弱,模型组最弱。②Western Blot检测结果。各组磷酸化P38丝裂原活化蛋白激酶含量比较,差异有统计学意义(F=3.872,P=0.038)。进一步两两比较,空白对照组(0.463±0.007)小于模型组(0.856±0.007)、P38阻断剂组(0.576±0.005)及含药血清组(0.508±0.004),差异有统计学意义(P=0.008;P=0.036;P=0.042);模型组大于P38阻断剂组和含药血清组(P=0.025;P=0.019);P38阻断剂组与含药血清组比较,差异无统计学意义(P=0.058)。各组细胞Ⅱ型胶原蛋白含量比较,差异有统计学意义(F=3.963,P=0.034)。进一步两两比较,空白对照组(0.884±0.007)大于模型组(0.434±0.007)、P38阻断剂组(0.616±0.003)及含药血清组(0.565±0.008),差异有统计学意义(P=0.007;P=0.031;P=0.038);模型组小于P38阻断剂组和含药血清组(P=0.035;P=0.028);P38阻断剂组与含药血清组比较,差异无统计学意义(P=0.066)。结论:牛膝含药血清能阻断骨关节炎软骨细胞P38丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路,进而保护软骨细胞,其效果与SB203580相当。
目的观察知母皂苷是否能对抗脂多糖(LPS)引起的小鼠腹腔巨噬细胞炎症介质释放并探讨丝裂原活化蛋白激酶(MARK)信号转导通路影响。方法实验设对照组,脂多糖组,知母皂苷低、中、高剂量组和阻断剂组,Griess法测定巨噬细胞培养上清液一氧化氮(NO)含量变化;酶联免疫吸附法测定巨噬细胞培养上清液中白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;免疫化学染色法观察诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达。结果加入脂多糖作用2

哪里 h,巨噬细胞上清液中NO含量明显增加,24 h达高峰,知母皂苷(10、30、100μmol/L)可抑制脂多糖引起的IL-1β、TNF-α、NO增加和iNOS表达增多,100μmol/L知母皂苷组IL-1β、TNF-α和NO水平分别从(698.8±32.0)ng/L、(257.4±27.3)ng/L和(181.0±19.9)μmol/L下降到(382.7±48.9)ng/L、(111.6±23.9)ng/L和(82.6±18.1)μmol/L;SP600125和SB203580均可不同程度抑制脂多糖引起的巨噬细胞IL-1β、TNF-α和NO增加;S-甲基异硫脲可完全对抗脂多糖引起NO释放。结论知母皂苷明显抑制脂多糖引起的巨噬细胞炎症因子释放,其机制与下调p38MAPK和c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路表达有关。
[Objective] The aim is to study the effects of ligustrazine on the lipopolysaccharide (LPS)-induced inflammation activated through arachidonicacid (AA) pathway, which would provide the experimental basis for extending the clinical application of ligustrazine. [Method] The effects of ligustrazine (1 and 10 μmol/L, 6 h) on the expression levels of COX-2, 5-LOX and FLAP were investigated in LPS-treated (1 mg/L, 2 h) primary human coronary artery endothelial cells.

5小时后,白花丹素的绿色荧光已可在细胞浆中发现。12小时后,绿色荧光出现在细胞核周围。24小时后,仅剩细胞外的绿色荧光。 结论 1、白花丹素以浓度依赖方式抑制A549及H23细胞的生长。 2、白花丹素诱导A549及H23细胞的细胞周期停滞。可能与白花丹素抑制细胞生长有关。细胞周期停滞可部分归因于Cdc2及cyclinB1的下调。

3、白花丹素在A549细胞中可通过上调p53而增加p21的水平,在H23细胞中却无此作用。这可能与H23细胞中p53基因(M246I)的突变而引起该蛋白部分失活有关。 4、白花丹素在A549及H23细胞中均诱导caspase-3及caspase-9的激活并最终导致细胞凋亡性死亡。 5、白花丹素在A549及H23细胞明显增加细胞内活性氧化物的水平。而在予活性氧化物清除子预处理后,细胞内活性氧化物的水平明显降低。 6、白花丹素在A549及H23细胞通过抑制PI3K/Akt/mTOR通路诱导细胞自噬。 7、Chloroquine, bafilomycin及wortmannin抑制白花丹素诱导的细胞自噬。 8、SB202190及SB203580通过增强PI3K/Akt/mTOR通路的抑制增加白花丹素诱导的细胞自噬。 9、在白花丹素诱导的细胞凋亡与细胞自噬间有交互联系,白花丹素能被细胞完整而迅速地吸收,并分布于细胞质及细胞核。
研究背景：

Pazopanib 海水淹溺是导致急性肺损伤（acute lung injury，ALI）的常见病因。生活中，有很多因素可以导致ALI的发生，如异物误吸，传染性肺炎、毒物接触等等，这其中就包括淹溺，尤其是海水淹溺。淹溺诱发的肺损伤多是由于气道内被动吸入过多液体，破坏了肺泡结构，导致肺水清除功能和气体交换功能下降，最终发生肺水肿和通气\血流比例下调，出现进行性低氧血症和呼吸窘迫，严重者会进展成急性呼吸窘迫综合症（acute respiratory distress syndrome，ARDS），甚至死亡。近年来，关于海水淹溺性急性肺损伤的研究大量展开，但都是基于动物模型基础上的研究，关于其中的致伤机制也陆续被揭示。 凋亡是一种由基因控制的程序性细胞死亡过程。生理情况下的凋亡对于维持机体新陈代谢，促进内环境稳定有积极作用；病理情况下的凋亡尤其是过度凋亡，会导致死亡物质大量堆积，死亡物质的清除引起吞噬细胞的集聚，促使炎症介质大量释放，加重肺损伤。最近，ALI中肺泡上皮细胞凋亡的研究被大量报道。我科前期的研究发现，在海水吸入型急性肺损伤(seawater 可能 inhalation 点击此处 induced acute lung injury，SWI-ALI）中，肺泡上皮细胞及内皮细胞的凋亡是增加的[1]。诱发细胞凋亡的因素有很多，调节通路更是多种多样。野生型p53（wild type p53，wtp53）是调节细胞凋亡的重要因子，SWI-ALI中，wtp53基因及其调节通路是否参与了海水诱导的细胞凋亡，及相关作用机制未曾揭示。 实验目的： 通过复制SWI-ALI大鼠模型，观察海水吸入后对肺组织上皮细胞凋亡的影响，同时观察野生型p53和其调节的凋亡相关基因及p38基因在海水作用时的表达，探讨在海水吸入型肺损伤发生后野生型p53诱导肺上皮细胞凋亡的作用机制，并进一步研究了海水触发野生型p53表达的机制。

实验方法： 实验一：40只SD大鼠随机分为空白对照组、海水1、3、6、12h组，每组8只。4个海水处理组大鼠气管内注入4ml/kg海水，分别作用1h、3h、6h和12h；对照组除不吸人海水外，其余处理同海水淹溺组。于各时间点上放血处死大鼠，行动脉血气分析，测肺湿/干重比（W/D)， HE染色观察肺组织病理形态改变，RT-PCR检测wtp53、Bax、Bcl-2及细胞色素c（cytochrome-c，Cyt-c）mRNA的表达，免疫组化法分析wtp53、p-p38和Bax表达变化，western blotting分析wtp53、p38和p-p38、p-p53、Bax、Bcl-2和Cyt-c及活化caspase-3的蛋白表达。 实验二：新传代的细胞常规培养4天后干预。除对照组外均在培养基中加入海水，海水干预浓度为40%（即1ml总体积中含0.4ml海水），孵育时间为3h；实验设对照组、海水组、海水+PFT-α组、海水+SB203580组、海水+DMSO组，在加入海水后，立即将20μM的PFT-α、SB203580及10μl的DMSO加入培养基中共同孵育。流式细胞仪检测各组细胞凋亡，Western blotting检测各组p-p38、p-p53和其相关下游目的蛋白的表达。 实验结果： 实验一：海水吸入后，血气结果显示大鼠出现了明显的低氧血症，HE结果示肺组织破坏严重，且海水作用时间越久，肺组织损伤越严重；海水吸入引起促凋亡基因wtp53、Bax及Cyt-c的mRNA表达增加（P0.

05，P＜0.01)。结论PCF可抑制8J·cm~(-2)UVA诱导的HaCaT细胞凋亡，其作用机理与抑制UVA诱导的ROS产生、p38MAPK通路激活和caspase-3活化有关。
在动物体内，干细胞持续更新分化产生的各类型终末分化细胞对维持组织器官的功能有着至关重要的作用。哺乳动物睾丸中的精原干细胞(SSCs)持续分化产生精子这一过程贯穿于雄性个体生长发育的整个时期，可以说SSCs是种系维持和遗传进化的一个桥梁和枢纽。SSCs不仅可作为再生性治疗的优良种子细胞，也是成体干细胞研究的良好体外模型。微小RNA (microRNAs)在多种组织器官细胞的基因调控中发挥重要的作用，包括细胞自我更新、分化、增殖及凋亡，同样也是干细胞的重要调控因子。miR-34家族中的miR-34c，在细胞内的多个过程中都有作用，对精子发生过程也有重要的调控作用。Nanos是一类进化保守的RNA结合蛋白，在生殖细胞发育中发挥功能，包括原始生殖细胞和生殖干细胞。在小鼠中，Nanos2在SSCs中表达，在精子发生过程中具有维持干细胞多能性的作用。本研究以miR-34c作为研究对象，预测发现Nanos2是miR-34c的靶基因之一，构建其双荧光素酶报告基因载体及双荧光素酶报告基因突变载体验证靶基因，通过在分离的原代及传代SSCs中转染合成的miRNA模拟物、抑制物，及使用含有miR-34c慢病毒颗粒转导小鼠的曲细精管，检测、分析生殖细胞分化特异性标志基因的变化，深入研究了miR-34c对生殖细胞分化特异性标志基因的调控作用，研究结果证实miR-34c可能会通过靶向Nanos2以促进SSCs的分化。

1.小鼠精原干细胞的分离和培养 采集新生6至12dpp小鼠睾丸，去除白膜，用胶原酶和DNA酶消化使SSCs与睾丸支持(Sertoli)细胞分离。传代SSCs使用不同溶液及因子组合筛选培养体系，最终确定DMEM+15%KSR+0.25μmol 点击此处 L-1A83-01为无血清无饲养层最佳培养体系。在该培养体系下细胞传代，通过形态学观察、计数结合PCR、免疫荧光染色、BrdU掺入染色、AP染色等检测方法，对分离的SSCs特性进行鉴定后证实：该培养体系能够维持小鼠SSCs的自我更新，证明所培养的精原干细胞为典型SSCs。

www.selleck.cn/products/sch772984.html 2.与小鼠精原干细胞发育密切相关的miR-34c靶基因的筛选、确定 通过miRwalk (miRNA靶基因预测)网站，得到一系列miR-34c可能直接作用的靶基因，从中选择了一个与小鼠SSCs发育及精子发生密切相关的Nanos2基因。通过构建含有Nanos2-3′UTR及miR-34c预测结合靶位点突变Mut-Nanos23′UTR的双荧光素酶报告基因载体，与miR-34c共转染Hela细胞，测定双荧光素酶发光值。结果证实Nanos23′UTR与miR-34c直接结合，这提示miR-34c可能通过靶向Nanos2发挥作用。 3. miR-34c在小鼠雄性精原干细胞精子发生过程中的作用 通过向SSCs中转染合成的miR-34c模拟物和抑制物，以及含有miR-34c慢病毒毒液的培养液培养小鼠曲细精管，通过qRT-PCR技术及免疫荧光染色、Western selleck抑制剂 blot、曲细精管的Whole-mount staining等方法检测减数分裂相关基因的表达变化。检测结果发现，过表达miR-34c后，Nanos2表达特异性显著下调，Scp3、Stra8等减数分裂后期标记基因的表达明显上调。以上实验结果表明，miR-34c可促进小鼠SSCs向精子细胞分化。
目的：探讨新疆维吾尔族妇女子宫颈癌组织中C/EBPβ基因、Ki-67基因和PCNA基因的表达，阐明C/EBPβ基因在新疆维吾尔族妇女子宫颈癌组织细胞增殖的作用。

方法：收集喀什地区人民医院，自治区人民医院2010年1月至2012年9月维吾尔族患者10例新鲜癌组织样本及10例新鲜癌旁组织标本，使用RT-PCR方法，检测C/EBPβ基因和Ki-67基因的mRNA表达水平。收集维吾尔族子宫颈组织石蜡包埋标本100例。使用免疫组织化学方法检测C/EBPβ基因、Ki-67基因和PCNA基因蛋白质表达水平。 结果:1. C/EBPβ基因在新疆维吾尔族子宫颈癌旁组织中mRNA表达水平高于癌组织。Ki67基因在新疆维吾尔族妇女子宫颈癌组织中的mRNA表达水平高于癌旁组织。2. C/EBPβ蛋白在维吾尔族妇女慢性子宫颈炎组织中表达水平高；在子宫颈鳞癌组织中表达水平低。与此不同的是，Ki-67蛋白质和PCNA蛋白质在慢性子宫颈炎组织中表达水平低;而在子宫颈鳞癌组织中表达水平高。C/EBPβ蛋白、Ki-67蛋白质和PCNA蛋白质在子宫颈鳞癌组织和慢性子宫颈炎组织中的表达水平分析使用非参数秩和检验统计结果表明，C/EBPβ蛋白在维吾尔族子宫颈鳞癌组织与慢性子宫颈炎组织表达水平有统计学差异。Z=-4.415,P双侧为0.000（P
目的：本研究以体外培养的细粒棘球蚴原头节为研究对象，将不同浓度的P38抑制剂ML3403体外作用于细粒棘球蚴原头节，探讨P38抑制剂ML3403体外对细粒棘球蚴原头节的作用。 方法：从自然感染细粒棘球蚴病的绵羊肝脏内采集细粒棘球蚴原头节，将其加入RPMI1640培养基中体外培养，5d后，将原头节分别加入不同浓度ML3403（12.5、25、50、80、100μmol/L）中体外孵育。每组加入原头节约2000个。不同浓度ML3403作用不同时间，在光镜下观察原头节的形态变化，同时利用伊红染色的方法显示原头节的活力并绘制活力曲线；电子显微镜下观察原头节超微结构改变；用Western blot检测原头节内p38蛋白表达水平；用Caspase-3活性检测试剂盒检测原头节内caspase-3酶活性。 结果：孵育5d后，正常和DMSO对照组的原头节形态和活力几乎没有改变，而50μmol/LML3403组原头节活力下降约50.5%。通过伊红染色观察发现，随着ML3403作用时间的延长和浓度的增加，ML3403对原头节的生长抑制作用越明显。连续观察5d，100μmol/LML3403组对原头节有较强的杀伤作用，此时几乎没有存活的原头节；80μmol/L和50μmol/LML3403组的头节活力也分别仅为13.34±2.09%和49.5±1.

05)。结论:瑞香素具有较强抗炎活性,对大鼠SAP具有明显保护作用。
目的:探讨电针对自发性胰岛素抵抗大鼠血管内皮p38MAPK及心肌超微结构的影响。方法:以8只雄性LETO大鼠作为空白组,将16只雄性OLETF大鼠随机分为两组,即电针组及模型组,每组8只。空白组及模型组进行正常饲养,不给予其它处理。电针组针刺双侧内关、三阴交、足三里及肾俞,并予同侧足三里及三阴交加电针刺激。每日1次,每次20min,持续4周。治疗结束后,禁食12h,次晨眼眶静脉窦采血。检测各组大鼠空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、稳态模型评估的胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、C肽(C-P)。白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA),主动脉内皮p38MAPK蛋白表达及左心室心肌超微结构。结果:模型组FPG、FINS、C-P、HOMA-IR、TNF-α、IL-6、MDA的血液水平及p38MAPK蛋白表达水平较空白组显著升高(P<0.05),SOD水平较空白组降低(P<0.05);电针组的FPG、FINS、C-P、TNF-α、IL-6、MDA的血液水平及p38MAPK蛋白表达的水平较模型组显著降低(P<0.01,P<0.05),SOD水平较模型组升高(P<0.05)。电镜显示,针刺干预能改善心肌细胞的病理状态。结论:针刺能改善胰岛素抵抗及炎性状态,有助于内皮功能障碍的改善,对心肌病理变化具有一定的良性作用。
胚胎干细胞(ESCs)具有向多向分化的潜能,诱导多能干细胞(i

http://www.selleckchem.cn/products/ldk378.html PSCs)是来源于体细胞重编程的多能细胞,具有类似ESCs的功能特性,并能避免伦理争议。由ESCs/i

PSCs分化而来的心肌细胞分化能广泛应用于心血管疾病的机制研究、药物筛选以及移植修复受损心肌等应用性研究。相对于使用转录因子和细胞因子,小分子化合物促ESCs/i PSCs向心肌细胞分化因具有高效、可重复、简便、机制清晰等优势而日益受到重视,文章介绍中药及小分子化合物诱导ESCs/i PSCs向心肌细胞分化的研究进展。
人类脂肪及相关组织除了作为被动热量贮存体系,本身还承担着大量的内分泌功能。其转化、调控、排泌诸多生物效应分子,总称”脂肪细胞因子(Adipocytokines)”。其中,脂联素是极为重要的一类分泌蛋白,具有广泛的信号转导及代谢调控效应。脂联素配体产生生物学效应依赖其受体(Adipo 有 也许 R),而受体在不同部位的表达程度各异且受诸多因子调控。迄今,针对脂联素的分子生物学探究总体围绕下列三个层面:①脂联素(及其受体)分子构架、信号转导与串话(Crosstalk)及生物效应;②脂联素(及其受体)在人及模式生物不同组织分布及表达调节;③脂联素(及其受体)表观遗传学、表达与功能受其他影响因子的调控机制。本文就脂联素及其受体信号转导与功能作一综述,通过探讨脂联素和其他相关生物分子互相作用,探寻代谢性疾病潜在的干预靶点。
目的探讨鞘内注射神经生长因子(NGF)预处理对局麻药所致神经损伤大鼠脊髓脱髓鞘反应的影响。方法雄性SD大鼠24只,体质量250~280

g,采用随机数字表法将其分为4组(n=6):假手术组(S组)、神经损伤组(L组)、生理盐水组(NS组)和NGF预处理组(NGF组)。L组、NS组和NGF组均在鞘内置管后1 d鞘内注射10%利多卡因20μL,其中NGF组在注射利多卡因前1 h,鞘内注射NGF 30μg(20μL)预处理。于鞘内注射利多卡因后1 d、2 d和3 d时测定甩尾潜伏期(TFL)。行为学测试完成后取脊髓组织,采用免疫组化法测定髓鞘碱性蛋白(MBP)的表达,Western blot法测定p38 MAPK磷酸化表达水平。结果与S组比较,L组和NS组鞘内注射利多卡因后1~3 d TFL均延长,脊髓内MBP的含量减少,p38 MAPK磷酸化的表达上调(P
肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)可以诱导间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的迁移,但其促进迁移机制尚不清楚.研究使用Calphostin C抑制剂来抑制PKCα的活性,从而研究TNF-α诱导MSCs迁移的作用是否通过激活PKCα来完成.利用50,ng/m L的TNF-α处理MSCs,划痕实验和Transwell实验表明TNF-α可以诱导MSCs的迁移.加入PKCα的抑制剂Calphostin C后,可以抑制TNF-α对MSCs迁移或侵袭的诱导,并降低迁移标志基因MYL9(Myosin light chain 9,MYL9)、CYR61(Cysteine rich 61,CYR61)的表达.以上结果表明,PKCα抑制剂Calphostin C可以抑制TNF-α诱导的MSCs迁移.

全基因组基因表达谱分析表明AICAR有利于J1小鼠ES细胞的多能性维持。对AICAR处理后的J1小鼠ES细胞提取RNA进行表达谱芯片分析，以寻找AICAR的下游调控基因，并进一步揭示AICAR在ES细胞干性维持中的作用。芯片数据证明，AICAR能够显著上调干性相关基因的表达，同时也能下调分化相关转录因子的表达。利用筛选得到的基因，在DAVID（Database

for Annotation，Visualization and Integrated Discovery）在线软件上面进行GO（Gene Ontology）和KEGG（Kyoto Encyclopedia of Genes andGenomes）分析，发现AICAR不仅能够影响AMPK通路，同时也能影响其它与J1小鼠ES细胞的干性维持相关的通路，如BMP，MAPK和TGF-β通路等。 3. AICAR可通过促进BMP通路从而拮抗RA诱导的ES细胞分化，利于其多能性维持。利用Real-time PCR对AICAR处理及未处理的细胞中Bmp2，Bmp4及其下游调控基因Ids，Coch，Dusp9进行检测，发现这些BMP通路相关基因的表达均上调。同时，AICAR还能够抑制RA诱导的上述基因表达的下调。Dorsomorphin（Dorso）是BMP通路的抑制剂，而其对AICAR作用的抑制进一步表明AICAR能够通过激活BMP通路来维持ES细胞的多能性。 PARP抑制剂 4. AICAR影响J1小鼠ES细胞的表观遗传修饰。AICAR能够通过调控表观遗传相关基因，如Dnmt3a，Dnmt3b，Smarca2，Mbd3，Arid1a的表达，从而影响ES细胞的表观修饰状态。实验结果表明，AICAR处理后全基因组DNA甲基化（5-methylcytosine，5mC）水平下调，而DNA羟甲基化（5-hydroxymethyl cytosine，5hmC）水平保持不变。对于组蛋白修饰而言，AICAR处理导致组蛋白3第9位赖氨酸乙酰化（histone H3lysine9acetylation，H3K9Ac）水平的下调和组蛋白3第27位赖氨酸三甲基化（histone

H3lysine27tri-methylation，H3K27me3）水平的上调。此外，AICAR通过调控长的居间非编码RNA（long MAPK抑制剂 intervening non-coding RNA，lincRNA）的转录，从而影响ES细胞的表观遗传修饰状态。 5.小RNA（small RNA，sRNA）高通量测序结果表明AICAR能够显著影响对ES细胞发育具有重要作用的miRNAs的表达。我们对比了经AICAR处理的J1小鼠ES细胞和未经处理的J1细胞中miRNAs的表达模式，并利用Real-time PCR验证了这些差异表达的miRNAs，同时对多能性和分化相关的miRNAs和它们的靶标做了相互验证。结果表明大量多能性维持相关的miRNAs表达上调，而分化相关的miRNAs表达下调。

6. miR-134表达的下调在一定程度上促进了干性基因的表达。miR-134是分化相关的miRNA，在RA诱导的ES细胞分化过程中表达显著上升。与对照相比，AICAR处理的细胞中，miR-134的表达显著下调，而其靶标Nanog和Sox2的表达则上调。过表达miR-134导致干性基因Nanog，Oct4，Sox2和Klf4表达的下调，而AICAR的加入使靶标基因Nanog和Sox2的表达呈现回升趋势。 确认细节 7.靶向Myc基因的miRNAs的预测及验证。Myc在AICAR处理后显著下调。为了探索Myc基因表达下调的原因，我们利用TargetScan和miRanda两个数据库对可能靶向Myc的miRNAs进行了预测，并筛选了其中在AICAR处理后表达上调的miRNAs进行进一步的验证。结果证实miR-34a，34b，34c能够在J1小鼠ES细胞中抑制Myc的表达，而miR-135b和miR-340也可能直接靶向Myc基因mRNA的3非编码区（untranslatedregion，UTR）调控其表达。 总之，本研究表明AICAR的加入利于J1小鼠ES细胞的自我更新和多潜能性的维持，这将为ES细胞在医学上的研究及应用提供一定的理论基础。
第一章早期培养对人类胚胎干细胞(hESCs)遗传稳定和基因表达的影响 目的：既往的研究发现在长期培养的hESCs(>P30)中会发生一些遗传和表观遗传的改变,然而,对于P30以前是否也发生了一些改变目前知之甚少,我们的研究目的在于利用我们胚胎干细胞库的丰富资源,评估hESCs在分离后的早期培养过程(20代以前)的遗传学改变和基因表达的改变。 材料和方法：利用我们胚胎干细胞库的胚胎干细胞资源,分别选取核型正常的分离初始期(P4-P9)和早期(P20-P30)hESCs,其中5株进行SNP芯片用于分析遗传变化,12株行全基因组表达谱芯片用于分析基因表达变化。 结果：从我们选取的细胞库中核型正常,并已完成各项检查的12株hESCs的初始期和早期未分化样本进行的以上实验可得到以下结果(1)SNP芯片分析结果可知,有一些小片段的缺失和重复,这些片段的平均大小约为100kb,且不存在规律性的改变。(2)从表达谱的分析来看,在两个阶段的样本间平均仅有0.10士0.