17,与LIP+BI组相比,HG明显升高(P<0.01),ND值明显降低(P<0.01)。上述结果表明,肢体缺血预处理明显减轻了大鼠全脑缺血再灌注引起的海马CA1区迟发性神经元死亡、发挥了脑保护作用,而分别或联合切断双侧股神经和坐骨神经均可以部分阻断LIP的上述脑保护作用,提示神经途径参与了LIP诱导的脑缺血耐受。
TUNEL染色结果显示,脑缺血的sham组海马CA1区偶有棕黄色深染的TUNEL阳性细胞,神经元体积变小,核固缩,呈圆点状或扇形,染色质呈新月形或条形聚集于核周。脑缺血组海马CA1区可见大量的TUNEL阳性细胞,与sham组相比细胞数目明显增加(P<0.01),提示8min的全脑缺血对大鼠海马CA1区锥体细胞的打击是致命的,引起大量的神经元细胞凋亡。LIP+BI组TUNEL阳性神经元数与脑缺血组相比明显减少(P<0.01),说明LIP明显抑制全脑缺血引起的海马CA1区锥体细胞凋亡,诱导了脑缺血耐受。与LIP+BI组相比,FNS+LIP+BI组、SNS+LIP+BI组和FNS+SNS+LIP+BI组,海马CA1区TUNEL阳性细胞数明显增加,表明分别或联合切断双侧股神经和坐骨神经可拮抗LIP抑制凋亡的作用。 AZD2281供应商 2股神经和或坐骨神经在肢体缺血预处理上调海马CA1区p38MAPK表达中的作用 90只Wistar大鼠永久凝闭双侧椎动脉恢复两天后,随机分为以下9组:①全脑缺血的sham组(n=10):只暴露双侧颈总动脉,不阻断血流;②全脑缺血组(brain ischemia, BI)(n=10):夹闭双侧颈总动脉8min后恢复再灌注;③LIP+BI组(n=10):夹闭双侧股动脉10min、再灌注10min、反复3次作为肢体缺血预处理后,即刻夹闭双侧颈总动脉8min作为损伤性缺血,然后恢复再灌注;④股神经切断(femoral nerve resection, FNS)+全脑缺血组(n=10):切断双侧股神经,即刻给予8min全脑缺血;⑤股神经切断+LIP+全脑缺血(FNS+LIP+BI)组(n=10):LIP前切断双侧股神经,即刻给予8min全脑缺血。⑥坐骨神经切断(sciatic nerve resection,SNS)+全脑缺血组(n=10):切断双侧坐骨神经,即刻给予8min全脑缺血;⑦坐骨神经切断+LIP+全脑缺血(SNS+LIP+BI)组(n=10):LIP前切断双侧坐骨神经,即刻给予8min全脑缺血;⑧股神经切断+坐骨神经切断+全脑缺血(FNS+SNS+BI)组(n=10):切断双侧股神经及双侧坐骨神经,即刻给予8min全脑缺血;⑨股神经切断+坐骨神经切断+LIP+全脑缺血(FNS+SNS+LIP+BI)组(n=10):LIP前切断双侧股神经及双侧坐骨神经,即刻给予8min全脑缺血。以上各组大鼠在sham手术或末次缺血再灌注12h断头取脑,各组分别取5只用于免疫组织化学、5只用于Western
更多 blotting,检测大鼠海马CA1区p-p38MAPK的表达。 免疫组化结果显示,全脑缺血的sham组和全脑缺血组海马CA1区p-p38MAPK阳性表达较少,阳性细胞胞核着色,呈棕黄色,染色浅,积分光密度分别为3.37±0.12、3.30±0.03,阳性细胞总面积分别为6056.23±522.3、6106.62±458.43(μm2,下同)。LIP+BI组海马CA1区神经元p-p38MAPK的表达明显增多,胞核着色加深,呈深棕黄色,其积分光密度和阳性细胞总面积分别为11.90±0.27和12036.60±693.91,与BI组相比有显著的统计学意义(P<0.01),表明LIP能够上调脑缺血大鼠海马CA1区p-p38MAPK的表达。与LIP+BI组相比,FNS+LIP+BI组海马CA1区神经元中p-p38MAPK的表达量较少,胞核染色较浅,有显著统计学差异(P<0.01),其积分光密度和阳性细胞总面积分别为4.63±0.07和6561.17±301.5。SNS+LIP+BI组海马CA1区神经元中p-p38MAPK的表达量降低,与LIP+BI组相比,阳性细胞积分光密度(5.07±0.13)和阳性细胞总面积(6835.91±401.47)均有明显统计学差异(P<0.01)。FNS+SNS+LIP+BI组海马CA1区神经元中p-p38MAPK的表达量少,胞核着色浅,阳性细胞积分光密度和总面积分别为3.15±0.22和6361.81±210.41,与LIP+BI组相比有明显统计学差异(P<0.01)。FNS+LIP+BI组、SNS+LIP+BI组和FNS+SNS+LIP+BI组中p-p38MAPK的表达量较少,与LIP+BI组相比有统计学差异(P
目的: Fasudil核磁共振 探讨硫酸镁对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)细胞经60Co γ射线照射后细胞增殖、周期、凋亡的影响,并分析其可能的机制。同时观察硫酸镁对胶质瘤U251细胞照射后细胞周期、凋亡的影响。研究结果为硫酸镁的临床应用提供实验依据和支撑。 方法: 1、取对数生长期的HUVEC细胞,采用CCK-8法检测硫酸镁对细胞存活率及增殖的影响,筛选合适浓度的硫酸镁。用流式细胞仪检测细胞周期分布和AnnexinV/PI双染色法检测细胞凋亡情况。 2、用NO试剂盒和SOD试剂盒分别测定NO含量和SOD活性,硫代巴比妥酸法(thiobarbituric acid,TBA)测定丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量变化。 3、Real-Time PCR方法检测ICAM-1mRNA、NF-κB mRNA表达。 4、不同浓度的硫酸镁预处理对数生长期的脑胶质瘤U251细胞,经γ射线照射后不同时间点收集细胞,采用流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡率的变化。 5、数据分析采用SAS8.