采用MTT法检测Ad-NK4单用及与BOR联合应用对RPMI8226细胞增殖的抑制作用。2.采用PI流式细胞术检测各作用组RPMI8226细胞凋亡的影响。3.采用Western Blot技术检测各作用组RPMI8226细胞Cleaved caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表达水平的变化。研究结果:1. RPMI8226细胞分别按Ad-GFP组、Ad-NK4组、BOR组、Ad-GFP+BOR联合组及Ad-NK4+BOR联合组进行处理，采用MTT法测量各组在24h、48h和72h的细胞增殖情况。在24h时，以上各组的细胞增殖抑制率分别为6.65%、37.4%、27.1%、21.2%和68.5%。在48h时，以上各组的细胞增殖抑制率分别为0、52.6%、29.7%、34.6%和59.7%。在72h时，以上各组的细胞增殖抑制率分别为4.9%、59.7%、50.7%、41.3%和74.1%。在不同时间点，Ad-NK4与BOR联合作用组对RPMI8226细胞增殖抑制率均明显高于BOR单独作用组。2. Ad-NK4和BOR联合作用组RPMI8226细胞凋亡率（47.5%），明显高于Ad-NK4（12.1%）或BOR（14.5%）单独作用组。3. H 89 Westernblot结果显示：联合作用组RPMI8226细胞Cleaved

caspase-3和Bax蛋白水平均明显高于BOR或Ad-NK4单独作用组，而Bcl-2蛋白水平却相反，同时在联合作用组Bax/Bcl-2比率增加。结论： Ad-NK4可增强BOR对RPMI8226细胞增殖的抑制，增加RPMI8226细胞的凋亡，并且可能通过活化Caspase-3和上调Bax/Bcl-2比率的途径增强凋亡作用。
1.程序性的翻译后修饰调控FEN1降解及基因组稳定性 作为结构特异性内切和外切核酸酶,分叉DNA单链内切酶1(FEN1)在多种代谢途径中起维持稳定基因组的关键作用,包括DNA复制、修复和凋亡DNA片段化。在细胞周期各个阶段,核酸酶持久性的存在,被认为对细胞周期和基因组稳定性有着不利的影响。而对FEN1翻译后修饰(PTM)过程进行研究发现,FEN1核酸酶的降解是有细胞周期依赖性的,并由精确且有顺序性PTM步骤所调控的。通过研究发现,磷酸化FEN1在S末期从DNA复制复合物上脱落下来,作为FEN1的降解起始步骤。磷酸化对于小泛素化是一种信号,而随后小泛素化诱导FEN1泛素化,并在蛋白酶体介导下降解。对程序性PTM中的相关几个位点进行突变,会导致细胞中的FEN1不易降解、Cyclin STA-4783分子量 B表达稳定且明显延迟细胞周期的G1与G2/M期,另外还会造成染色体异常分离。FEN1降解过程的研究阐明了一种细胞中调控核酸活性平衡性的新机制。 2. FEN1E160D突变小鼠在苯并芘诱导下有高发性的肺癌 FEN1属于Rad2核酸家族中的一个成员,拥有5’分叉内切酶(FEN),5’外切酶(EXO)和切口依赖的核酸内切酶(GEN)等3种结构特异的核酸酶活性,因此它能加工多种DNA复制及修复途径中产生的中间产物。以前的研究发现,在多数癌症患者中的一组FEN1突变与单核苷酸多态性中,FEN1突变体的EXO与GEN活性均有不同程度的削弱和损失。本研究过程中,已经建立的携带有FEN1E160D突变的小鼠模型,它能作为人类中该突变所代表的模型进行研究。实验结果显示,当FEN1突变小鼠暴露在有碱基损伤的化学试剂下,它们会发生肺癌。我们提出的疑问是,如果具有该突变的人类个体,是否对来自烟草的烟雾更为敏感,是否会在个体成长发育的早期形成肺部肿瘤或肺癌。为解决这个疑问,本研究用苯并芘(B[α]P)处理E160D突变小鼠。B[α]P是一种来自烟草燃烧后产生的化合物,也是烟雾中最主要的DNA损伤剂。实验证明了FEN1利用GEN活性剪切泡状底物,该底物模拟了NER过程中产生的DNA中间产物。E160D突变小鼠的细胞,由于缺失了GEN活性,因此在修复B[α]P作用DNA后形成的加合物的过程中,存在着一定程度的缺陷。实验结果观察到,在长时间暴露于B[α]P后,E160D突变的MEF细胞累积了许多DNA链断裂,染色体断裂,且染色体数目也出现异常。此外,当幼鼠被注射B[α]P后,在发育早期发现E160D比野生型有更高的肺腺癌发病率。研究结果说明,携带有GEN活性缺失的FENl突变体E160D,在B[α]P诱导下将会使个体更易发生早期的肺部肿瘤,进而导致肺癌发生的高风险性。
目的：本研究比较吉非替尼在中国上市前及上市后晚期肺腺癌患者的生存差异,并对其临床因素进行分析。

Selleck INCB024360 方法：本研究收集了2002年1月—2010年12月在中国医学科学院肿瘤医院接受过化疗的558例晚期肺腺癌患者资料进行回顾分析。按照配对病例对照研究设计,根据年龄、性别和吸烟史三个因素进行严格配对后筛选出255例仅接受过姑息化疗的上市前组患者和255例接受过吉非替尼治疗的上市后组患者。患者的临床特征包括年龄、性别、吸烟史、ECOG评分(Eastern Cooperative Oncology Group performance status,ECOG PS)、临床分期、器官转移、既往化疗方案数等也进行了分析。对于不同组间疗效比较应用χ2检验；对生存时间分析应用Kaplan-Meier法,Log-rank对生存曲线的差异进行显著性检验,COX回归进行多因素分析。以P<0.001)、年龄<0.001)是明显改善全组510例患者总生存的因素。上市后组患者的总生存在大多数亚组包括不同年龄、性别、吸烟史、ECOG0-1分、临床分期、是否有肺转移、胸膜转移、骨转移、脑转移、肾上腺转移和肝转移、既往化疗方案数亚组均较上市前组有显著延长(p<0.05)。中位总生存期(OS)为24.0个月,病理类型为腺癌(P
目的研究EML4-ALK、EGFR、KRAS及c-Met四种基因在中国肺腺癌患者中的基因状态。 方法收集110例中南大学湘雅医院肺腺癌患者的手术标本。应用FISH、直接测序法、绝对荧光定量PCR、IHC法检测EML4-ALK、 KRAS、EGFR、c-Met四种基因在中国肺腺癌患者中的基因状态。 结果四种基因EML4-ALK、EGFR、KRAS、c-Met的异常状态所占比例分别为EML4-ALK10%、EGFR52.7%、KRAS3.6%、c-Met5.5%,且两两之间基本不共存。因此,约71.8%的中国肺腺癌患者存在上述四种基因的异常状态。 结论本实验在部分中国肺腺癌患者中行上述四种基因检测,结果约71.