结论间歇性缺氧导致大鼠认知功能障碍,可能与神经元自噬累积有关,TGF-β1可以减轻间歇性缺氧诱导的自噬增多。
目的观察姜黄素(curcumin)对稳定表达APP695swe的Neuro-2a小鼠脑神经瘤细胞(N2a/APP695swe)中自噬流的作用;再进一步深入探讨其作用于N2a/APP695swe细胞中自噬流的可能机制。方法首先将细胞分成4组野Selleck生型对照组(WT组)、空白对照组(Control组)、溶剂对照组(Sham组)、姜黄素组(Curcumin组)。透射电镜观察各组中自噬体形态特点,Western blot检测p62和LC3Ⅱ的表达;并分别运用Western blot及免疫荧光检测Rab7蛋白表达,实时荧光定量PCR(quantitative real-time R428订单PCR,q RT-PCR)检测Rab7 mRNA表达。在N2a/APP695swe细胞中分别过表达及沉默Rab7后,将细胞分成5组Control组、pcDNA3.1组、pcDNA3.1-Rab7组、NC-siRNA组和Rab7-siRNA组。再运用透射电镜观察各组自噬体形态特点,Western blot检测p62和LC3Ⅱ蛋白表不达。结果经姜黄素处理后,透射电镜观察到细胞中的自噬体主要为单层膜结构的自噬溶酶体,同时,自噬活性关键性蛋白LC3Ⅱ的表达增加(P=0.000),而自噬底物蛋白p62的表达减少(P=0.000);Rab7在蛋白水平及mRNA水平均明显升高(P=0.000、0.000)。过表达Rab7后,自噬体主要为单层膜结构的自噬溶酶体,p62蛋白表达明显减少(P=0.000),LC3Ⅱ蛋白表达无明显变化(P=0.669)。