方法分离健康体检者PBMC,与不同量的慢性乙型肝炎(CHB)患者血清共培养,通过荧光定量聚合酶链式反应(PCR)法检测CHB患者和共培养后健康体检者PBMC中的HBV-DNA水平。采用荧光定量PCR法检测共培养后健康体检者PBMC中GRP78、GRP94、CHOP核酸水平的表达量。结果 22例CHB患者PBMC中,有16例检测到HBV-DNA,阳性www.selleck.cn/products/BI-2536.html检出率为72.7%。外周血HBV-DNA拷贝数越高,PBMC中HBV-DNA阳性率越高。健康体检者PBMC中加入CHB患者血清共培养,PBMC中HBV-DNA水平会随着加入的CHB患者血清量增加而升高。CHB患者血清与健康体检者PBMC共培养不同时间,PBMC中ERS蛋白GRP78、GRP94和CHOP在基因水平的表达均升Fosbretabulin分子量高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 CHB患者PBMC中可检测到HBV-DNA,HBV感染可以引起PBMC中ERS相关蛋白水平升高。
目的 探讨同型半胱氨酸(Hcy)是否通过降低P66Shc的DNA甲基化状态,引起血管内皮损伤。方法 培养人脐静脉内皮细胞,加入不同浓度Hcy诱导人脐静脉内皮细胞损伤Trichostatin A购买,检测P66Shc、 active-Caspase3的蛋白表达水平并应用甲基化特异性PCR检测P66Shc的DNA甲基化状态改变。另同时加入不同浓度甲基化抑制剂5-氮杂胞嘧啶核苷(5-Azacytidine)并检测P66Shc、 active-Caspase3的蛋白表达水平。结果 Hcy诱导人脐静脉内皮细胞中P66Shc和active-Caspase3蛋白表达增加,并可引起P66Shc的DNA低甲基化。