利用Western blot法检测ALKBH1蛋白在患者癌组织和正常组织以及胰腺癌细胞系和正常胰腺细胞中的表达情况。采用CRISP

利用Western blot法检测ALKBH1蛋白在患者癌组织和正常组织以及胰腺癌细胞系和正常胰腺细胞中的表达情况。采用CRISPR-Cas9技术,构建ALKBH1敲除的SW1990胰腺癌细胞系。然后采用CCK-8细胞活力测定、CCK-8细胞增殖实验、细胞划痕实验和Transwell侵袭实验等方法,比较ALKBH1表达水平不同的胰腺癌细胞的活力、增殖能力GSK2399872A说明书、迁移能力和侵袭能力的差异。结果分析公共数据库结果显示胰腺癌组织中ALKBH1表达水平显著高于正常组织(P<0.01)。Western blot检测结果显示在七对组织样本中,癌组织中ALKBH1蛋白表达水平均明显高于正常胰腺组织(P<0.05)。Real-time PCR和Western blot检测结果显示ASPC-1,PANselleck screening libraryC-1,BXPC-3和SW1990细胞中ALKBH1 mRNA和ALKBH1蛋白的表达水平均高于CCC-HPE-2细胞(P<0.05)。Western blot检测结果和细胞流式结果显示成功构建ALKBH1敲除的SW1990胰腺癌细胞系ALKBH1-sg1和ALKBHl-sg2。CCK-8细胞活力测定、CCK-8细胞增殖实验、细胞划痕实验和Transwell侵袭实验结果显示在敲除ALKBH1的两组胰腺癌细胞中,其细胞活力、增殖能力,迁移能力和侵袭能力均显著下降(P<0.05)。结论本研究发现ALKBH1在胰腺癌组织及细胞系中呈高表达状态;敲除ALKBH1,可以抑制胰腺癌细胞活力,降低胰腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。背景TNM分期系统对胰腺癌患者术后预后的预测作用有限。列线图是一种简单有效的预测模型,目前已广泛应用于多种恶性肿瘤。

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