用PCR、DNA测序、RT-PCR和Westernblot检测bcr/abl基因在靶细胞中的整合和表达;用台盼蓝细胞计数法、流式细胞仪(FCM)和MTT法研究BCR/ABL对BaF3细胞生物学特性的影响。结果bcr/abl基因整合在BaF3细胞基因组中,BaF3-P210细胞能稳定表达bcr/abl基因及其蛋白。与对照组相比,BaERK inhibitor screening libraryF3-P210细胞增殖速度增快(P<0.05);G0/G1期细胞比例下降,S期和G2/M期细胞比例增高(P<0.05);经STI571处理后的细胞增殖抑制率为(54.08±1.90)%(P<0.05),早期凋亡率为(12.35±2.04)%(P<0.05)。结论成功构建的能稳定表达BCR/ABL的小鼠BaPI3K 抑制剂F3-P210转化细胞株具有增殖能力增强、细胞周期进程加速和对STI571敏感的恶性表型特征。”
“目的探索双歧双歧杆菌的完整肽聚糖(WPG)对大鼠腹腔巨噬细胞TNF-α的调控作用。方法以WPG刺激大鼠腹腔巨噬细胞;或以NF-κB的抑制剂NAC和ERK抑制剂PD98059分别预先孵育巨噬细胞,再用WPGGDC-0941DMSO溶解度刺激巨噬细胞,最后用RT-PCR检测巨噬细胞TNF-αmRNA的表达水平。结果 WPG刺激巨噬细胞后,其TNF-αmRNA的表达水平显著高于对照组(P<0.01)。但经NAC和PD98059分别预先孵育巨噬细胞后,其TNF-αmRNA的表达水平均明显低于WPG刺激组(P<0.01)。结论双歧双歧杆菌的WPG能上调巨噬细胞TNF-αmRNA的表达,这一过程受NF-κB和ERK的调控。