选择地塞米松(dexamethasone,DEX),一种选择性的GR受体激动剂,和去氧皮质酮(deoxycorticosterone,DOC),一种选择性的MR受体激动剂作为干预药物。(1)探索GR和MR受体激动剂对于有丝分裂原-植物血凝素(phytohemagglutinin,PHA)或者金黄色葡萄球菌超抗原(Staphylococcus aureus enterotoxin B,SSelleck AZD5363EB)诱导的人原代培养的淋巴细胞凋亡的作用;(2)探索DEX和DOC对于外源性凋亡途径的激活(caspase-8)和相关的信号分子IL-2和Fas L的作用;(3)探索GR和MR在基因的诱导、转录抑制和直接DNA结合方面的作用;(4)最后超表达野生型和突变型MR(转录抑制功能逆转为转录激活功能)来验证转录抑制是一种可能的机制,以及DOC的作用的MR依赖性。旨在AZD1152花费为盐皮质激素治疗脓毒症提供理论依据,为提高脓毒症的治疗提供有益的线索。方法从健康志愿者外周血分离淋巴细胞,体外培养2周后用PHA或SEB诱导其凋亡。采用流式记录法检测细胞凋亡及荧光检测法测试细胞caspase-8,caspase-9/6,caspase-3活性,进一步检测DEX和DOC作用下细胞凋亡及上述caspases活性的变化。在PHA与12-豆蔻酸-13Defactinib体外-乙酸佛波醇(phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)刺激的Jurkat细胞检测IL-2及IL-2 m RNA和Fas L m RNA水平及DEX与DOC作用下IL-2及IL-2 m RNA和Fas L m RNA水平。为检测DEX和DOC的作用是否为转录水平,引入蛋白合成抑制剂环己酰亚胺(cytoheximide,CHX),检测CHX存在下,DEX和DOC对IL-2 m RNA和Fas m RNA的作用。