12×109fu.L-1。重组慢病毒质粒pNL-HSP27-IRES2-EGFP-1的RNA干扰效率最高,为0.771。结论成功构建靶向大鼠HSP27基因RNAi慢病毒载体。为进一步研究HSP27功能和用慢病毒进行基因治疗奠定基础。
JNK作为丝裂原激活蛋白激酶家族成员,能使某些蛋白结构中丝氨酸/苏氨酸残基磷酸化,使其活化或改变其原有活性而产生异常效应。目前认为,JNK参与肥胖、胰岛素抵抗和炎症等代谢过程,阻断JNK通路可改善胰岛β细胞功能和胰岛素抵抗,诱导活化JNK通路可导致2型糖尿病(T2DM)的发生发展,本文总结近年关于JNK的研究状况,旨在说明其已经成为糖尿病研究方面一个新的关注点,阻断JNK信号转导通路可能成为糖尿病新的治疗途径。
帕金森病是常见的神经系统退行性疾病之一,帕金森病的发病与细胞凋亡有关,而p38丝裂原激活蛋白激酶信号传导途径参与了细胞凋亡的调控。本文主要对p38与帕金森病之间的关系予以综述。
基因敲除技术,是利用同源重组的基因打靶技术,将打靶构建物与野生型的等位基因同源重组并交叉互换,经筛选得到所需的某一目的基因缺失的DNA片段,并创建出表达特异性状的动物模型。由于干细胞培养和稳定转染技术的发展,使基因敲除在JNK-2的基因功能、酶学功能研究中的作用日益受到重视。本文就该技术及其在JNK-2研究中的应用、进展及存在的问题做一综述。
蓖麻毒素属于Ⅱ型核糖体失活蛋白,由具有催化活性的A链和凝集活性的B链组成,二者之间经二硫键连接。本研究旨在探讨蓖麻毒素在诱导小鼠淋巴细胞凋亡过程中信号转导通路的激活反应。通过MTS法检测蓖麻毒素的细胞毒性后,用流式细胞术分析胞内活性氧(ROS)水平,进而通过westernblot研究信号分子的表达。结果表明:在蓖麻毒素诱导小鼠淋巴细胞凋亡的过程中,胞内活性氧水平显著增高(P
目的:观察细胞外信号调节激酶(ERK)在肝纤维化组织中的表达变化及其与Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的相关性,并探讨其在肝纤维化发生中的作用.方法:二甲基亚硝胺(DMN)诱导大鼠肝纤维化,于用药1、2、3wk分别取肝组织;收集临床肝手术标本,包括纤维化肝组织和远癌的纤维化肝组织,以正常肝组织做对照.采用免疫组化法检测ERK在肝纤维化组织中表达和定位及其与Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的相关性.结果:随着大鼠注射DMN时间的延长,ERK、Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达逐渐增加,且在各时间组肝组织中ERK的表达与Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达呈正相关(1wk:r=0.75,0.68,P<0.05).同样,ERK在人肝纤维化组较对照组表达增加(1.068±0.258vs0.035±0.011,P<0.05).结论:ERK可能与肝纤维化的发生机制及胶原合成密切相关.
Nrf2是细胞调节抗氧化应激反应的重要转录因子。Keap1是Nrf2的胞浆蛋白伴侣分子。Nrf2-Keap1组成的抗氧化系统在细胞抗氧化应激反应中发挥重要的作用。氧化/抗氧化失衡是慢性阻塞性肺疾病(COPD)的主要发病机制之一。研究Nrf2-Keap1抗氧化系统在COPD中的作用日益受到重视。本文对Nrf2-Keap1抗氧化系统的组成与信号调控,及其在COPD中的作用进行了综述,提示其在治疗和预防COPD中可能发挥作用。
目的动态观察糖尿病(DM)大鼠肾小管骨形态发生蛋白-7(BMP-7)和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)在糖尿病肾病(DN)发病机制中的相互关系。方法将SD大鼠分为正常对照组(N组)、糖尿病组(DM组)和糖尿病胰岛素治疗组(DMT组),分别于成模后2、4、8、12、16和24周测定生化指标和肾脏指数,PAS染色观察肾脏病理形态改变,免疫组织化学检测BMP-7、p-p38MAPK、α-SMA和FN蛋白的表达;RT-PCR方法检测肾皮质BMP-7mRNA的表达。结果随DM病程延长,BMP-7蛋白和mRNA的表达较N组低,至24周时BMP-7蛋白仍有少量表达但mRNA无表达,DMT组表达显著增多;p-p38MAPK蛋白于N组无表达,DM组显著增多,8周时达高峰,DMT组则显著减少;α-SMA开始表达于DM16周组,而DMT组无表达。24周DM组和DMT组BMP-7蛋白表达与24h尿蛋白、肾脏指数、α-SMA、FN和p-p38MAPK呈显著负相关。结论BMP-7与p38MAPK之间可能相互调节,共同参与糖尿病肾病的发生发展过程。
青蒿素类衍生物包括二氢青蒿素、蒿甲醚、蒿乙醚和青蒿琥酯等,它们具有诸多治疗呼吸系统疾病的药理活性,包括治疗卡氏肺孢子虫肺炎、支气管哮喘、对肺组织损伤的保护作用。青蒿素类药物在治疗肺动脉高压以及肺纤维化方面具有潜在的药用价值。本文就近年来对青蒿素类药物治疗肺部疾病的研究现状及展望予以综述。
目的探讨中药方剂益肾活血汤通过p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号转导途径对肾小球系膜细胞纤连蛋白(FN)、Ⅳ型胶原(COLⅣ)表达的影响。方法采用血清药理学方法制备中药血清,体外培养肾小球系膜细胞分组为:对照组(正常鼠血清)I、L-1β组(正常鼠血清+10%IL-1β)、中药血清组(中药血清+10%IL-1β)。采用双抗体夹心ELISA法检测大鼠系膜细胞FN、COLⅣ表达,蛋白印记法(Western
此网站 NSC683864制造商 5FU blot)检测磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)及α-平滑肌肌动蛋白(-αSMA)水平。结果与IL-1β组相比,中药血清组FN、p-p38MAPK蛋白的表达量降低(P<0.01)。-αSMA、COLⅣ的表达亦降低(P<0.05)。结论中药益肾活血汤可降低肾小球系膜细胞-αSMA的表达,从而抑制肾小球系膜细胞的表型转化,减少细胞外基质FN、COLⅣ的表达,该作用可能是通过抑制p-p38MAPK信号通路而实现的。
肝纤维化是慢性肝损伤后的修复反应过程,肝硬化是肝纤维化的最终发展阶段。目前研究表明,肝纤维化发生的中心环节是肝星状细胞(HSCs)的增生和激活。激活后的HSCs产生大量以胶原为主的细胞外基质(ECM)成分和细胞因子(CK)。本综
目的:探讨c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路对胰岛βTc3细胞脂性凋亡的影响及吡格列酮(PGZ)的干预作用.方法:采用游离脂肪酸(FFA)诱导小鼠βTc3细胞凋亡;以MTT法观察FFA对细胞生长的抑制作用;流式细胞术检测细胞凋亡率;免疫细胞化学和Western Blot法检测在FFA、特异性JNK抑制剂SP600125及PGZ作用下磷酸化JNK(p-JNK)、磷酸化c-jun(p-c-jun)的表达.